一、分光光度計的組成部分
分光光度計的(de)型號(hao)繁多(duo),但(dan)其基本結構由以下幾部分組成:光源、單(dan)色器、吸收池、檢測系(xi)統及(ji)信號(hao)顯示系(xi)統。
1、光源
在吸光(guang)度的(de)測量中(zhong),要(yao)求光(guang)源(yuan)發出(chu)的(de)所需波(bo)長(chang)范圍內的(de)連續光(guang)譜(pu)具有足夠的(de)光(guang)強度,并能在一定(ding)時間內保持穩定(ding)。
2、單色器
單(dan)色(se)(se)器是能將光(guang)源(yuan)發射(she)的連續光(guang)源(yuan)分(fen)解為單(dan)色(se)(se)光(guang)并從中(zhong)選出(chu)任一波長單(dan)色(se)(se)光(guang)的光(guang)學系統(tong)。它(ta)由入射(she)狹(xia)縫、準光(guang)器、色(se)(se)散原件、聚焦元件和(he)出(chu)射(she)狹(xia)縫等(deng)幾個部分(fen)組成。
3、吸收池
吸(xi)收(shou)池又稱比(bi)色皿(min),用于盛(sheng)裝參比(bi)溶液(ye)和待測試液(ye)。儀器一般配有液(ye)層(ceng)厚度為0.5cm、1cm、2cm、3cm等(deng)的長方形比(bi)色皿(min)。
4、檢測系統
檢測(ce)(ce)系統通(tong)(tong)常(chang)通(tong)(tong)過利用(yong)光(guang)(guang)電(dian)(dian)效應(ying)將透過吸收池的(de)光(guang)(guang)信(xin)(xin)號(hao)(hao)轉(zhuan)變為可(ke)測(ce)(ce)的(de)電(dian)(dian)信(xin)(xin)號(hao)(hao),而且(qie)所產(chan)生(sheng)的(de)電(dian)(dian)信(xin)(xin)號(hao)(hao)應(ying)與照射于檢測(ce)(ce)器上的(de)光(guang)(guang)信(xin)(xin)號(hao)(hao)成正比。可(ke)見(jian)分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)常(chang)常(chang)使(shi)用(yong)光(guang)(guang)電(dian)(dian)管或(huo)光(guang)(guang)電(dian)(dian)倍增管做檢測(ce)(ce)器。
5、信號顯示系統
光電轉換(huan)器產(chan)生的各種電信號,經放大等處理后,用一(yi)定方式(shi)顯(xian)示出來,以便(bian)于(yu)計(ji)算和記錄(lu)。
二、分光光度計原理
分(fen)光(guang)(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)(guang)度(du)計的(de)(de)(de)(de)原理是采(cai)用一個可以產生多個波(bo)長的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)源,通過系列分(fen)光(guang)(guang)(guang)(guang)裝置,從而(er)產生特定波(bo)長的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)源,光(guang)(guang)(guang)(guang)線透過測試的(de)(de)(de)(de)樣(yang)(yang)品后,部分(fen)光(guang)(guang)(guang)(guang)線被吸收,計算樣(yang)(yang)品的(de)(de)(de)(de)吸光(guang)(guang)(guang)(guang)值,從而(er)轉(zhuan)化成(cheng)樣(yang)(yang)品的(de)(de)(de)(de)濃度(du),樣(yang)(yang)品的(de)(de)(de)(de)吸光(guang)(guang)(guang)(guang)值與樣(yang)(yang)品的(de)(de)(de)(de)濃度(du)成(cheng)正比。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來測(ce)量待(dai)測(ce)物(wu)質對可見光(guang)(guang)的(de)吸光(guang)(guang)度(du)并進行(xing)定(ding)量分析(xi)的(de)儀(yi)器,稱(cheng)為可見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)計(ji)。
2、紫外可見分光光度計
紫(zi)(zi)外(wai)可(ke)(ke)見光(guang)譜儀(yi)用來(lai)測(ce)量待測(ce)物質(zhi)對(dui)可(ke)(ke)見光(guang)或紫(zi)(zi)外(wai)光(guang)(200-760nm)的(de)吸光(guang)度并進(jin)行定量分析的(de)儀(yi)器,可(ke)(ke)以(yi)測(ce)定核酸(suan)和蛋白的(de)濃(nong)度,也可(ke)(ke)以(yi)測(ce)定細(xi)菌細(xi)胞(bao)密度。
3、紅外分光光度計
一般的紅(hong)外光譜(pu)是指(zhi)大(da)于760nm的紅(hong)外光譜(pu),這是研究有機化合物(wu)最(zui)常用的光譜(pu)區(qu)域,能分析(xi)各(ge)種狀態(氣、液、固)的試樣。
4、熒光分光光度計
熒(ying)光分(fen)光光度計是用于掃(sao)描(miao)液(ye)相(xiang)熒(ying)光標(biao)記(ji)物(wu)所發出的(de)(de)熒(ying)光光譜的(de)(de)一(yi)種儀器,應用于科研(yan)、化工、醫藥、生化、環(huan)保以及臨床(chuang)檢驗、食品(pin)檢驗、教學實驗等(deng)領域,通(tong)過(guo)對這(zhe)些參數的(de)(de)測定,不但可(ke)以做一(yi)般(ban)的(de)(de)定量分(fen)析(xi),而(er)且還可(ke)以推斷(duan)分(fen)子在(zai)各種環(huan)境下的(de)(de)構象變(bian)化,從而(er)闡明分(fen)子結構與功能之間的(de)(de)關(guan)系。