一、分光光度計的組成部分
分光光度計的型號繁多,但其基(ji)本結構由以下幾部(bu)分組成:光源、單色器、吸收池、檢測系統及信號顯示系統。
1、光源
在(zai)吸光(guang)度的(de)(de)測量中,要(yao)求(qiu)光(guang)源發出的(de)(de)所需(xu)波長范圍(wei)內的(de)(de)連續光(guang)譜(pu)具(ju)有足夠的(de)(de)光(guang)強度,并能在(zai)一定(ding)時間內保持穩定(ding)。
2、單色器
單色(se)器(qi)是能將光(guang)源發(fa)射的連續光(guang)源分解為單色(se)光(guang)并從(cong)中選出任一(yi)波長單色(se)光(guang)的光(guang)學系(xi)統(tong)。它由入射狹(xia)縫、準光(guang)器(qi)、色(se)散(san)原件、聚焦元(yuan)件和(he)出射狹(xia)縫等幾(ji)個(ge)部分組(zu)成(cheng)。
3、吸收池
吸收(shou)池又稱比色(se)皿,用于盛裝(zhuang)參比溶液(ye)和待測試液(ye)。儀器(qi)一(yi)般配(pei)有(you)液(ye)層厚度為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的長方形比色(se)皿。
4、檢測系統
檢測系統通常(chang)(chang)通過利用光(guang)(guang)電(dian)效應(ying)將透過吸收(shou)池的(de)光(guang)(guang)信(xin)號(hao)轉變為可測的(de)電(dian)信(xin)號(hao),而且所產生的(de)電(dian)信(xin)號(hao)應(ying)與照射于(yu)檢測器(qi)(qi)上的(de)光(guang)(guang)信(xin)號(hao)成(cheng)正(zheng)比(bi)。可見分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)常(chang)(chang)常(chang)(chang)使用光(guang)(guang)電(dian)管(guan)或光(guang)(guang)電(dian)倍增(zeng)管(guan)做檢測器(qi)(qi)。
5、信號顯示系統
光(guang)電(dian)轉換器(qi)產生的各種電(dian)信號,經放大等處理后,用一定方式顯示出(chu)來(lai),以(yi)便于計算和(he)記錄(lu)。
二、分光光度計原理
分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計的原理是采用一(yi)個可以(yi)產(chan)(chan)生多個波(bo)長(chang)的光(guang)(guang)源,通過(guo)系列分光(guang)(guang)裝(zhuang)置,從(cong)而產(chan)(chan)生特(te)定波(bo)長(chang)的光(guang)(guang)源,光(guang)(guang)線(xian)透過(guo)測試的樣(yang)(yang)(yang)品后,部分光(guang)(guang)線(xian)被吸(xi)收,計算樣(yang)(yang)(yang)品的吸(xi)光(guang)(guang)值,從(cong)而轉(zhuan)化成樣(yang)(yang)(yang)品的濃度,樣(yang)(yang)(yang)品的吸(xi)光(guang)(guang)值與樣(yang)(yang)(yang)品的濃度成正比。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來測量待測物質對(dui)可見光(guang)的吸光(guang)度并進行定量分析的儀器,稱(cheng)為可見分光(guang)光(guang)度計。
2、紫外可見分光光度計
紫外可(ke)見(jian)光(guang)譜(pu)儀(yi)用來測量(liang)待(dai)測物(wu)質對可(ke)見(jian)光(guang)或紫外光(guang)(200-760nm)的(de)(de)吸光(guang)度(du)并(bing)進行定量(liang)分析(xi)的(de)(de)儀(yi)器,可(ke)以(yi)測定核酸和蛋白的(de)(de)濃度(du),也可(ke)以(yi)測定細菌細胞密度(du)。
3、紅外分光光度計
一般的(de)紅外(wai)(wai)光(guang)譜是指大于(yu)760nm的(de)紅外(wai)(wai)光(guang)譜,這(zhe)是研究有機化(hua)合物(wu)最常(chang)用的(de)光(guang)譜區域,能分析(xi)各種狀態(氣、液(ye)、固)的(de)試樣。
4、熒光分光光度計
熒(ying)光(guang)分(fen)光(guang)光(guang)度計是用于(yu)掃描液相熒(ying)光(guang)標記(ji)物所發出的(de)(de)熒(ying)光(guang)光(guang)譜的(de)(de)一(yi)種儀器,應用于(yu)科(ke)研、化工、醫藥(yao)、生化、環保以(yi)及(ji)臨(lin)床檢驗(yan)(yan)、食品檢驗(yan)(yan)、教學實驗(yan)(yan)等領域,通過對這(zhe)些參(can)數的(de)(de)測(ce)定,不但可以(yi)做(zuo)一(yi)般的(de)(de)定量分(fen)析,而(er)且還可以(yi)推斷分(fen)子(zi)(zi)在(zai)各種環境下(xia)的(de)(de)構象變化,從而(er)闡(chan)明分(fen)子(zi)(zi)結構與功能之間的(de)(de)關系。