一、培養基配好后為什么必須立即滅菌

培養基(ji)配好后，必須要馬(ma)上進行(xing)滅菌處理(li)，這是為什(shen)么呢？

之所(suo)以(yi)培養(yang)(yang)基(ji)配好(hao)(hao)就要滅(mie)菌(jun)，是(shi)因為未滅(mie)菌(jun)的剛(gang)剛(gang)配置好(hao)(hao)的培養(yang)(yang)基(ji)是(shi)暴露在環境中的，可能染(ran)上(shang)環境中的大(da)量細菌(jun)，而(er)培養(yang)(yang)基(ji)也是(shi)這(zhe)些細菌(jun)生(sheng)長所(suo)需要的良(liang)好(hao)(hao)條件；如(ru)果不及時滅(mie)菌(jun)，會導(dao)致(zhi)在環境中染(ran)上(shang)的細菌(jun)大(da)量繁殖，消耗培養(yang)(yang)基(ji)中的營養(yang)(yang)成分，甚至產生(sheng)有(you)害物(wu)質，造(zao)成培養(yang)(yang)基(ji)滅(mie)菌(jun)后(hou)也不能使用。

二、如何檢查滅菌后的培養基是否為無菌

滅菌(jun)后，如果要求比較嚴(yan)格(ge)，必須是無菌(jun)培養基的(de)(de)話，可以進行無菌(jun)試驗，具體的(de)(de)方(fang)法是：

將已經滅完(wan)菌(jun)的(de)菌(jun)棒(bang)放到25－28℃的(de)恒溫(wen)環境(jing)中(zhong)避光培(pei)養3天(tian)后，拿出(chu)來檢查看(kan)袋內有(you)(you)(you)沒有(you)(you)(you)雜(za)菌(jun)滋(zi)生的(de)痕跡，看(kan)菌(jun)袋內有(you)(you)(you)沒沒有(you)(you)(you)導(dao)演(yan)變色、出(chu)現斑點(dian)等情況的(de)發生，如果有(you)(you)(you)就(jiu)證明(ming)滅菌(jun)不徹底。

三、影響培養基滅菌效果的因素有哪些

培養(yang)基滅(mie)菌(jun)要求要徹底，不徹底的(de)話可能影響(xiang)微生物的(de)培養(yang)，一(yi)般影響(xiang)培養(yang)基滅(mie)菌(jun)效果的(de)因(yin)素主要有(you)：

1、營養成分的保持

濕熱滅菌時，微(wei)生物被(bei)殺死的(de)(de)同(tong)時，培養(yang)(yang)基(ji)的(de)(de)營養(yang)(yang)成分(fen)也(ye)遭到了一定的(de)(de)破壞(huai)(huai)，特別是(shi)氨(an)基(ji)酸(suan)(suan)(suan)和(he)維(wei)生素。如在121℃，僅20min，就有(you)59%的(de)(de)賴(lai)氨(an)酸(suan)(suan)(suan)和(he)精氨(an)酸(suan)(suan)(suan)及其他堿(jian)性氨(an)基(ji)酸(suan)(suan)(suan)被(bei)破壞(huai)(huai)，蛋氨(an)酸(suan)(suan)(suan)和(he)色氨(an)酸(suan)(suan)(suan)也(ye)有(you)相(xiang)當(dang)數(shu)量被(bei)破壞(huai)(huai)。在熱的(de)(de)作用下某些營養(yang)(yang)成分(fen)還(huan)可能因受(shou)熱而(er)相(xiang)互之間發生反應，造成培養(yang)(yang)基(ji)中(zhong)原有(you)營養(yang)(yang)成分(fen)的(de)(de)數(shu)量變化，因而(er)影響培養(yang)(yang)基(ji)質量。

2、微生物的耐熱性

細菌芽(ya)孢的熱阻較大，滅菌所(suo)需(xu)要的時(shi)間取(qu)決(jue)于(yu)把細菌芽(ya)孢減少到所(suo)規定數目的時(shi)間。

3、pH值

pH值對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時，微生物最不易死亡。pH<6.0時，微生物比較容易死亡，此時H+很容易滲入微生物的細胞，從而改變細胞的生理反應，促使其死亡。所以培養基的pH越低，所需的時間也越短。

4、培養基成分

油(you)脂(zhi)、糖(tang)(tang)類(lei)及蛋白質等(deng)組成的(de)高濃(nong)度(du)有(you)機物會(hui)包于(yu)細胞的(de)周圍形式一(yi)層薄膜、影(ying)響熱(re)的(de)傳導。而高濃(nong)度(du)的(de)鹽類(lei)、色素(su)則削弱(ruo)其耐熱(re)性，滅菌較易。例如：大腸桿菌在水中加熱(re)至60-65℃便死亡(wang)，在10%糖(tang)(tang)液中需70℃加熱(re)4-6分鐘(zhong)才(cai)死亡(wang)，在30%糖(tang)(tang)液中需30分鐘(zhong)才(cai)死亡(wang)。一(yi)般糖(tang)(tang)類(lei)含量(liang)較多(duo)的(de)時候最好選用115℃，30分鐘(zhong)；一(yi)般的(de)培養基(ji)可選擇121℃20分鐘(zhong)。

5、泡沫

泡沫中的空氣形(xing)成隔熱(re)層(ceng)，使熱(re)量難以滲透進去，殺死其中的雜(za)菌(jun)。

6、顆粒

顆(ke)粒(li)小，容易滅(mie)菌(jun)，顆(ke)粒(li)大，則難滅(mie)菌(jun)。對(dui)于(yu)含有少(shao)量較大顆(ke)粒(li)及粗纖維的培(pei)養(yang)基(ji)，可用粗濾的方法(fa)（不應影(ying)響(xiang)培(pei)養(yang)基(ji)質量）予以除去，培(pei)養(yang)基(ji)結塊會(hui)造成培(pei)養(yang)基(ji)滅(mie)菌(jun)的不徹(che)底。

8、滅菌鍋內空氣是否排凈

這個是(shi)影響(xiang)滅(mie)菌(jun)是(shi)溫(wen)度和壓(ya)(ya)力比例關系的(de)要(yao)(yao)點，同樣達到了相同的(de)壓(ya)(ya)力的(de)情況(kuang)下，如(ru)果(guo)空氣未能排凈，也就是(shi)說不是(shi)純蒸汽滅(mie)菌(jun)，此時的(de)溫(wen)度不一定能達到目的(de)要(yao)(yao)求，會嚴(yan)重影響(xiang)滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo)。