一、什么是細胞培養基

細胞培養基是培養細胞的培養基，既是供給細胞營養(yang)(yang)和(he)促(cu)使細胞生殖增殖的基(ji)礎物質，也是培養(yang)(yang)細胞生長(chang)和(he)繁殖的生存(cun)環境，一(yi)般是鹽(yan)、碳水化合(he)物、維生素(su)、氨基(ji)酸、代謝前體、生長(chang)因(yin)子(zi)、激素(su)和(he)微(wei)量(liang)元素(su)的復雜混合(he)物。

二、常用的細胞培養基有哪些

細胞培養(yang)基(ji)的(de)種類眾多(duo)，由于不同細胞系對(dui)這(zhe)些成分的(de)要求(qiu)各(ge)不相同，因此產生了(le)不同類型的(de)培養(yang)基(ji)，常用的(de)細胞培養(yang)基(ji)主要有：

1、MEM培養基

是(shi)一種添加了營養(yang)物(wu)的最(zui)低必(bi)需培養(yang)基(ji)，僅(jin)含有12種必(bi)需氨基(ji)酸、L-谷氨酰胺和8種維生素(su)，含糖(tang)量為(wei)1g/L。MEM是(shi)一種最(zui)基(ji)礎、最(zui)常用(yong)的細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)，主(zhu)要應用(yong)于貼壁(bi)細(xi)胞(bao)的培養(yang)，在(zai)添加血(xue)清后，可(ke)用(yong)于培養(yang)多(duo)種單層生長的細(xi)胞(bao)，如成纖(xian)維細(xi)胞(bao)。修改配方后的a-MEM則可(ke)廣泛應用(yong)于各(ge)種哺乳動物(wu)懸浮和貼壁(bi)細(xi)胞(bao)培養(yang)。

2、DMEM培養基

氨基酸含量(liang)是MEM的(de)(de)兩倍(bei)，維生素含量(liang)是MEM的(de)(de)4倍(bei)，以及硝(xiao)酸鐵(tie)、丙酮酸鈉和(he)一些(xie)補充氨基酸。此外，DMEM分為低糖型和(he)高(gao)糖型，葡萄糖含量(liang)分別(bie)為1g/L和(he)4.5g/L。（低糖適(shi)于依賴性貼壁細胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)，特別(bie)適(shi)用于生長(chang)速度快、附著(zhu)性較(jiao)差的(de)(de)腫瘤(liu)細胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)；高(gao)糖更適(shi)合高(gao)密度懸浮(fu)細胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)，也適(shi)用于附著(zhu)性較(jiao)差，但又不希望它脫離原(yuan)來生長(chang)點(dian)的(de)(de)克隆培(pei)(pei)養(yang)，也可用于雜交瘤(liu)中骨髓瘤(liu)細胞(bao)和(he)DNA轉染的(de)(de)轉化細胞(bao)的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)。）

3、IMDM培養基

用于(yu)淋(lin)巴細(xi)胞(bao)和(he)雜交瘤細(xi)胞(bao)的生(sheng)長。與DMEM相比，添加了(le)HEPES和(he)硒，硝(xiao)酸(suan)鉀(jia)取代了(le)硝(xiao)酸(suan)鐵，并且(qie)含(han)有更多的氨基酸(suan)、維(wei)生(sheng)素和(he)無(wu)機鹽。

4、Ham 's F-12K培養基

用于支持(chi)原代細胞的生(sheng)長和分化。F-12K增加了氨基酸、丙酮酸、生(sheng)物素、鈣、鎂(mei)、腐胺(an)和酚(fen)紅的含量。

5、DMEM/F12培養基

DMEM和(he)F12的(de)1:1混(hun)合(he)物，能夠在低血清條件下支持多(duo)種哺乳動物細胞(bao)(bao)的(de)培(pei)養(yang)，在此培(pei)養(yang)基中(zhong)成功培(pei)養(yang)的(de)細胞(bao)(bao)包(bao)括：MDCK、神經膠(jiao)質細胞(bao)(bao)、成纖維(wei)細胞(bao)(bao)和(he)人(ren)內皮細胞(bao)(bao)等。

6、McCoy’s 5A培養基

廣泛用于多種原代細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)系(xi)的培養，如來源(yuan)于骨髓(sui)、皮膚、脾臟(zang)、腎(shen)臟(zang)和肺等(deng)組織(zhi)的哺乳動物(wu)原代細(xi)胞(bao)。

7、RPMI-1640培養基

是(shi)在(zai)McCoy’5A的基礎上(shang)進行改良研發出的，最(zui)初用于人白(bai)血病細(xi)胞(bao)的懸浮(fu)培(pei)(pei)養(yang)，后來發現(xian)也適用于HeLa、MCF-7、PC12、外周血單核細(xi)胞(bao)（B/T淋巴細(xi)胞(bao)）和(he)星形細(xi)胞(bao)的培(pei)(pei)養(yang)。RPMI 1640與其(qi)它(ta)培(pei)(pei)養(yang)基的區別是(shi)含有還(huan)原型谷胱甘肽和(he)高濃度維(wei)(wei)生(sheng)素。此外還(huan)含有含有MEM、DMEM中不含的生(sheng)物素、維(wei)(wei)生(sheng)素B12和(he)對氨基苯。

8、L15培養基

L-15培(pei)(pei)養(yang)基的(de)配方中(zhong)(zhong)不含用于CO2平衡環境的(de)碳酸(suan)(suan)(suan)鹽(yan)(yan)緩(huan)沖系統, 而(er)是用磷酸(suan)(suan)(suan)鹽(yan)(yan)、L-精(jing)氨酸(suan)(suan)(suan)、L-組氨酸(suan)(suan)(suan)和 L-半(ban)胱氨酸(suan)(suan)(suan)作為緩(huan)沖劑。用半(ban)乳(ru)糖和丙酮(tong)酸(suan)(suan)(suan)鈉(na)代替葡萄糖以(yi)(yi)防止乳(ru)酸(suan)(suan)(suan)的(de)形(xing)成。可以(yi)(yi)在無CO2培(pei)(pei)養(yang)箱中(zhong)(zhong)進行細胞培(pei)(pei)養(yang)，或者擰緊瓶蓋(gai)培(pei)(pei)養(yang)。

三、細胞培養基的品質要求

細(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)有多(duo)種(zhong)，不(bu)同種(zhong)類的細(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)用于培(pei)養(yang)不(bu)同細(xi)胞(bao)(bao)，一(yi)般來(lai)說，好的細(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)，需要滿足(zu)以下(xia)幾點要求：

1、外觀

顏色(se)、粉末細度須均勻。

2、溶解性

培(pei)養(yang)基完全溶(rong)解，可以避(bi)免培(pei)養(yang)基內(nei)營養(yang)成(cheng)分的(de)流失。

3、pH值

哺乳類動物細胞生(sheng)長需要合適(shi)的(de)酸堿度(du)，同時pH值的(de)測定也可以檢查培養基的(de)批(pi)間差(cha)異。

4、水分

培養基的營養成份很(hen)豐富，利(li)于微生物(wu)的滋長(chang)，因(yin)此水分的含(han)量控制可以延長(chang)有效(xiao)期。

5、冰點滲透壓

細胞必須生(sheng)活(huo)在合適的滲透壓環境中，同時滲透壓值的測定也可(ke)以檢查培養基的批間差異(yi)。

6、菌落總數

粉末培養基不是無菌制劑，培養基本身(shen)的營(ying)養成分很(hen)豐富(fu)，容易滋(zi)生微生物，因(yin)此菌落(luo)的控制(zhi)可(ke)以延長有效(xiao)期

7、細胞生長試驗

可(ke)檢(jian)查細胞(bao)培養基是否有(you)促生(sheng)長的(de)能力，以及(ji)是否有(you)不利細胞(bao)生(sheng)長的(de)毒素。

8、細菌內毒素

為(wei)滿足(zu)生物制(zhi)品細菌內毒素(su)的控(kong)制(zhi)要求，作(zuo)為(wei)生物制(zhi)品生產原料的培養基同樣需要細菌內毒素(su)控(kong)制(zhi)。

9、穩定性

確定(ding)產(chan)(chan)品的儲存、運(yun)輸條件(jian)，產(chan)(chan)品的保質期限(xian)。

10、一致性

驗證產品的均一性。