一、培養基滅菌的方法有哪些

培養基配制好后，必須立即滅菌，因為如果長時間不進行滅菌，培養料內的微生物就會在料內發酵生長，從而破壞培養基內的營養成分。一般來說，培養基的滅菌(jun)方法主要(yao)有以下六種：

1、干熱滅菌

多用(yong)于耐熱器皿滅(mie)(mie)菌，例如移液管(guan)和玻璃平皿等(deng)、玻璃試管(guan)或者金屬器皿等(deng)等(deng)，可(ke)在170攝氏度滅(mie)(mie)菌2-4h，也可(ke)在200所(suo)說(shuo)的滅(mie)(mie)菌0.5-1h。接(jie)(jie)種環，接(jie)(jie)種針(zhen)等(deng)、涂布棒之類(lei)的實驗器材(cai)，可(ke)用(yong)酒精燈直(zhi)接(jie)(jie)灼(zhuo)燒滅(mie)(mie)菌。

滅(mie)菌效果：滅(mie)菌效果好(hao)，能殺(sha)死一切微生物，芽(ya)孢也(ye)不例(li)外。

注(zhu)意事項：干(gan)熱滅(mie)(mie)菌過程(cheng)的(de)熱穿(chuan)透效果差且比較慢，因(yin)此(ci)在烘箱內進行(xing)干(gan)熱滅(mie)(mie)菌時，不(bu)可擺放過滿；塑(su)料、橡膠等不(bu)耐(nai)熱材質不(bu)可采用此(ci)方法(fa)滅(mie)(mie)菌；紙(zhi)、棉的(de)滅(mie)(mie)菌溫(wen)度不(bu)能超(chao)過170℃。

2、高壓蒸氣滅菌（濕熱滅菌）

通常用于實驗室大(da)部分培養基的滅菌(jun)(jun)，亦可用在玻璃(li)器皿上、金屬器皿滅菌(jun)(jun)。通常采用121°C高壓滅菌(jun)(jun)15-20min或116°C高壓滅菌(jun)(jun)30min，滅菌(jun)(jun)參數(shu)可以依據培養基的不(bu)同而(er)調(diao)節(jie)。

滅菌效果：它能殺死一切微生物，芽孢也(ye)不例外。

注意事項：滅(mie)菌時冷空氣沒有排出、培養基本(ben)身含有過(guo)多的(de)(de)芽孢、滅(mie)菌方式(shi)不當、滅(mie)菌鍋中的(de)(de)物(wu)品放置過(guo)滿，均會造(zao)成滅(mie)菌的(de)(de)失(shi)敗(bai)；在進行(xing)容(rong)器滅(mie)菌時，容(rong)器不可密(mi)封，需與滅(mie)菌鍋內空氣流(liu)通(tong)。

3、水浴-加熱-流動蒸汽滅菌

常用(yong)于含有不耐熱(re)成(cheng)分培(pei)養基的滅菌(jun)(jun)(jun)，如XLD瓊脂(zhi)等、亞硒酸(suan)鹽(yan)胱氨酸(suan)增菌(jun)(jun)(jun)液等、亞硫酸(suan)鉍瓊脂(zhi)等等。用(yong)流動蒸汽(qi)對培(pei)養基進行(xing)滅菌(jun)(jun)(jun)，若無對應(ying)流動蒸汽(qi)滅菌(jun)(jun)(jun)設備，既可(ke)用(yong)水浴加熱(re)，也(ye)可(ke)用(yong)“蒸”法(fa)殺(sha)菌(jun)(jun)(jun)。

滅菌效果：能(neng)殺(sha)死微生物的(de)(de)繁殖體，無法(fa)殺(sha)死芽孢(bao)體，用這(zhe)種方法(fa)殺(sha)菌的(de)(de)培養基，一般抑菌性較(jiao)強，或(huo)者需要很短的(de)(de)時間。

注意(yi)事項：不同培(pei)養(yang)基(ji)成分(fen)耐(nai)熱性有(you)(you)差別，加熱時應注意(yi)，如將(jiang)含有(you)(you)亞硒酸鹽的培(pei)養(yang)基(ji)（SC、SBG等）加熱到(dao)90°C左(zuo)右，過高的加熱可導(dao)致亞硒酸氫鈉的分(fen)解，培(pei)養(yang)基(ji)變紅色，含有(you)(you)瓊脂的培(pei)養(yang)基(ji)可以加熱沸(fei)騰4-6次，也可以沸(fei)水(shui)浴后20-30min讓瓊脂充分(fen)溶(rong)解。

4、過濾滅菌

多用(yong)于抗生素或含有(you)不耐熱成(cheng)分(fen)的培養基滅(mie)菌，通常采(cai)用(yong)孔徑為0.22μm微孔濾膜(mo)或者濾芯(xin)(xin)過濾除菌。實驗室生產無菌空氣時亦可(ke)使用(yong)此法，采(cai)用(yong)特殊(shu)濾芯(xin)(xin)或者濾網，過濾和除菌空氣。

滅菌(jun)效果：能去(qu)除(chu)常見的(de)細(xi)菌(jun)，真菌(jun)和芽孢(bao)體，卻無法(fa)去(qu)除(chu)支原體，病毒和其他體積(ji)微小的(de)生物(wu)。

注意事項：使用前通常需按照(zhao)說明書使濾(lv)(lv)膜(mo)或(huo)(huo)濾(lv)(lv)芯浸濕(shi)；需要嚴(yan)格遵守(shou)過濾(lv)(lv)器或(huo)(huo)者濾(lv)(lv)膜(mo)的指示，速度過快或(huo)(huo)者過濾(lv)(lv)體(ti)積過大都會造成濾(lv)(lv)膜(mo)的斷裂和(he)除(chu)菌(jun)(jun)的失敗；黏度較大或(huo)(huo)有(you)沉淀的培養(yang)基不(bu)適合用此方式除(chu)菌(jun)(jun)。

5、輻照滅菌

微波、紫(zi)外(wai)線(xian)、X射(she)線(xian)、γ射(she)線(xian)都(dou)可(ke)以進(jin)行(xing)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)。γ射(she)線(xian)具有(you)很強的(de)穿(chuan)透力，滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)效果(guo)良好，在食品(pin)中得到了廣泛的(de)應用、藥(yao)品(pin)行(xing)業的(de)產品(pin)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)，亦多(duo)用于(yu)微生物培(pei)養基中、實驗(yan)器(qi)材的(de)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)。某些特殊培(pei)養基或者添加劑成分，由于(yu)不宜采(cai)用高溫(wen)蒸汽滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)、過濾除菌(jun)(jun)(jun)等等，可(ke)用γ射(she)線(xian)照射(she)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)。紫(zi)外(wai)線(xian)殺菌(jun)(jun)(jun)作(zuo)用弱(ruo)，很少有(you)穿(chuan)透力，一般只(zhi)適(shi)用于(yu)實驗(yan)室內空氣或者物體表面的(de)殺菌(jun)(jun)(jun)。

滅菌(jun)效果：γ射線具有(you)良(liang)好的滅菌(jun)和穿透力(li)，能(neng)殺(sha)滅一切微生物，芽孢(bao)體也不例外(wai)。

注(zhu)意事項(xiang)：并非所(suo)(suo)有培養基都(dou)可(ke)(ke)以(yi)采(cai)用γ射(she)線(xian)輻照(zhao)滅菌方(fang)式，一(yi)些染料或不(bu)穩定(ding)成分經輻照(zhao)后會發生(sheng)變化；γ射(she)線(xian)對瓊脂(zhi)有一(yi)定(ding)的(de)損(sun)傷，所(suo)(suo)以(yi)在固體培養基滅菌的(de)過程中，輻照(zhao)劑(ji)量及瓊脂(zhi)的(de)加入量均需適當(dang)調整；玻璃(li)制品、金屬制品一(yi)般不(bu)可(ke)(ke)采(cai)用此方(fang)法滅菌。

6、化學試劑滅菌

通常用環(huan)(huan)(huan)氧乙烷殺(sha)菌(jun)(jun)，及(ji)各種(zhong)消毒劑的浸泡滅菌(jun)(jun)。環(huan)(huan)(huan)氧乙烷在平皿(min)中曾(ceng)經得(de)到廣泛應(ying)用、對一次(ci)性醫療產品(pin)進行滅菌(jun)(jun)，卻因(yin)環(huan)(huan)(huan)境污染大，滅過(guo)菌(jun)(jun)后的制品(pin)需(xu)要較長(chang)時間放置(zhi)，讓環(huan)(huan)(huan)氧乙烷散去，目前已逐漸為其(qi)他滅菌(jun)(jun)方式所(suo)代替。

滅(mie)菌效(xiao)(xiao)(xiao)果(guo)：不同(tong)消(xiao)(xiao)(xiao)毒劑的殺(sha)滅(mie)效(xiao)(xiao)(xiao)果(guo)是有區別的，粗略地(di)可以分為低效(xiao)(xiao)(xiao)消(xiao)(xiao)(xiao)毒劑、中(zhong)，高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)消(xiao)(xiao)(xiao)毒劑。環氧乙烷(wan)是一種(zhong)高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)消(xiao)(xiao)(xiao)毒劑，能殺(sha)死含有芽孢等一切微生物。

注意事項：此類(lei)滅菌(jun)方(fang)式通常會有殘留，且對環境(jing)有污染，因此一般不(bu)適(shi)合用(yong)(yong)于直(zhi)接進行微生物培養相關器皿滅菌(jun)；殺菌(jun)能力(li)越強的(de)消(xiao)毒劑，刺激(ji)性、腐蝕性、毒性往往越大，使(shi)用(yong)(yong)時需(xu)注意防(fang)護。

二、培養基滅菌用哪種方法好

培養基的滅菌方(fang)法眾多，采(cai)用不適(shi)當的滅菌方(fang)法可能會破(po)壞培養基的質量，會改(gai)變(bian)顏(yan)色、透明度降低(di)、pH變(bian)化等，那么(me)哪(na)種(zhong)方(fang)法比較好呢？

由于不同(tong)微生物培(pei)養(yang)需要的培(pei)養(yang)基不同(tong)，滅菌方法的選擇方面也有所不同(tong)，一般來說，培(pei)養(yang)基的滅菌方法應按照說明書或驗證試驗參數來采(cai)用不同(tong)方法，常規的是采(cai)用濕熱滅菌，特殊要求(qiu)的采(cai)用薄(bo)膜過濾等。