一、培養基滅菌的方法有哪些

培養基配制好后，必須立即滅菌，因為如果長時間不進行滅菌，培養料內的微生物就會在料內發酵生長，從而破壞培養基內的營養成分。一般來說，培養基的滅菌方法主(zhu)要有以下六種：

1、干熱滅菌

多用于耐熱器(qi)皿(min)(min)滅菌(jun)，例如移液管和玻璃平(ping)皿(min)(min)等、玻璃試管或者金屬器(qi)皿(min)(min)等等，可(ke)在170攝氏(shi)度滅菌(jun)2-4h，也可(ke)在200所說的(de)滅菌(jun)0.5-1h。接(jie)種(zhong)環，接(jie)種(zhong)針等、涂(tu)布(bu)棒之類的(de)實驗器(qi)材，可(ke)用酒(jiu)精燈直接(jie)灼燒滅菌(jun)。

滅菌效果：滅菌效果好，能殺死(si)一切(qie)微生物，芽孢也(ye)不例外。

注意事(shi)項(xiang)：干熱滅(mie)菌(jun)(jun)過程(cheng)的熱穿透效果差且(qie)比(bi)較(jiao)慢，因(yin)此(ci)在烘箱(xiang)內進行干熱滅(mie)菌(jun)(jun)時，不(bu)可擺(bai)放過滿；塑料、橡(xiang)膠等不(bu)耐(nai)熱材質不(bu)可采用此(ci)方法(fa)滅(mie)菌(jun)(jun)；紙、棉的滅(mie)菌(jun)(jun)溫度不(bu)能超(chao)過170℃。

2、高壓蒸氣滅菌（濕熱滅菌）

通常用于實(shi)驗室(shi)大部(bu)分培(pei)養基的滅(mie)(mie)菌(jun)，亦可(ke)用在玻璃器(qi)皿(min)(min)上、金屬器(qi)皿(min)(min)滅(mie)(mie)菌(jun)。通常采(cai)用121°C高(gao)壓(ya)滅(mie)(mie)菌(jun)15-20min或116°C高(gao)壓(ya)滅(mie)(mie)菌(jun)30min，滅(mie)(mie)菌(jun)參數可(ke)以依(yi)據培(pei)養基的不(bu)同而調節。

滅(mie)菌效果：它能殺死一切微生物，芽(ya)孢(bao)也不例外。

注意事項：滅菌(jun)(jun)時冷空(kong)氣(qi)沒有排出、培養基(ji)本身(shen)含(han)有過多的芽孢、滅菌(jun)(jun)方式不當、滅菌(jun)(jun)鍋中的物品(pin)放置過滿，均會造(zao)成滅菌(jun)(jun)的失敗；在進行容器(qi)滅菌(jun)(jun)時，容器(qi)不可(ke)密封，需與(yu)滅菌(jun)(jun)鍋內空(kong)氣(qi)流通。

3、水浴-加熱-流動蒸汽滅菌

常用(yong)(yong)于含有不耐熱成分培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)滅菌(jun)(jun)，如XLD瓊(qiong)脂等(deng)(deng)(deng)(deng)、亞硒酸鹽胱氨酸增(zeng)菌(jun)(jun)液等(deng)(deng)(deng)(deng)、亞硫酸鉍瓊(qiong)脂等(deng)(deng)(deng)(deng)等(deng)(deng)(deng)(deng)。用(yong)(yong)流動蒸(zheng)汽對培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)進行滅菌(jun)(jun)，若無對應流動蒸(zheng)汽滅菌(jun)(jun)設備，既可用(yong)(yong)水(shui)浴加熱，也可用(yong)(yong)“蒸(zheng)”法(fa)殺菌(jun)(jun)。

滅菌效果：能殺死(si)微生物的繁(fan)殖體(ti)，無法(fa)殺死(si)芽孢體(ti)，用這種方法(fa)殺菌的培養基，一般抑菌性(xing)較強，或(huo)者(zhe)需要很短的時間。

注意(yi)事(shi)項：不同培養基成分(fen)耐熱(re)(re)性有差別，加(jia)(jia)熱(re)(re)時應注意(yi)，如將(jiang)含有亞(ya)硒(xi)酸鹽(yan)的(de)(de)培養基（SC、SBG等）加(jia)(jia)熱(re)(re)到90°C左右，過高(gao)的(de)(de)加(jia)(jia)熱(re)(re)可(ke)導致(zhi)亞(ya)硒(xi)酸氫鈉(na)的(de)(de)分(fen)解，培養基變紅色，含有瓊脂(zhi)的(de)(de)培養基可(ke)以加(jia)(jia)熱(re)(re)沸騰4-6次(ci)，也可(ke)以沸水(shui)浴后20-30min讓瓊脂(zhi)充分(fen)溶(rong)解。

4、過濾滅菌

多用(yong)于抗生素或(huo)含有不耐熱成分的培養基滅菌，通常采用(yong)孔徑為0.22μm微孔濾(lv)膜或(huo)者(zhe)濾(lv)芯過濾(lv)除(chu)菌。實(shi)驗室生產無菌空氣時(shi)亦(yi)可使用(yong)此法(fa)，采用(yong)特殊濾(lv)芯或(huo)者(zhe)濾(lv)網，過濾(lv)和除(chu)菌空氣。

滅菌效果(guo)：能去除常見的細(xi)菌，真(zhen)菌和(he)芽孢體，卻無法去除支原體，病毒和(he)其(qi)他(ta)體積微小的生物(wu)。

注意事項：使用(yong)前(qian)通常需按照說明(ming)書使濾(lv)膜(mo)或(huo)濾(lv)芯浸濕；需要(yao)嚴格遵守過濾(lv)器或(huo)者濾(lv)膜(mo)的(de)(de)指示，速(su)度過快或(huo)者過濾(lv)體積(ji)過大都會造成濾(lv)膜(mo)的(de)(de)斷裂和除菌的(de)(de)失敗；黏度較大或(huo)有(you)沉(chen)淀的(de)(de)培(pei)養基不適合用(yong)此方式除菌。

5、輻照滅菌

微波、紫外線、X射(she)(she)線、γ射(she)(she)線都可以進行(xing)(xing)滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)。γ射(she)(she)線具有很強(qiang)的穿透(tou)(tou)力，滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)效果(guo)良好，在食(shi)品中得(de)到了廣泛的應(ying)用(yong)、藥品行(xing)(xing)業的產(chan)品滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)，亦(yi)多用(yong)于微生物培養(yang)基中、實驗器(qi)材的滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)。某些(xie)特殊(shu)培養(yang)基或(huo)者(zhe)添加(jia)劑成分，由于不(bu)宜采(cai)用(yong)高溫蒸(zheng)汽滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)、過濾除(chu)菌(jun)(jun)等等，可用(yong)γ射(she)(she)線照射(she)(she)滅(mie)(mie)菌(jun)(jun)。紫外線殺菌(jun)(jun)作用(yong)弱，很少有穿透(tou)(tou)力，一般只(zhi)適(shi)用(yong)于實驗室內空氣或(huo)者(zhe)物體表面的殺菌(jun)(jun)。

滅菌(jun)效(xiao)果：γ射線(xian)具(ju)有良好(hao)的(de)滅菌(jun)和穿透力，能殺滅一切微生物，芽孢體(ti)也不例外。

注意事項(xiang)：并非所有(you)培養基都可(ke)以采(cai)用(yong)γ射線輻照滅(mie)(mie)菌方式，一些染料或不(bu)穩定成分經輻照后會發生(sheng)變化；γ射線對瓊脂有(you)一定的損傷，所以在固體培養基滅(mie)(mie)菌的過(guo)程中(zhong)，輻照劑量及瓊脂的加入量均需適(shi)當調整；玻(bo)璃(li)制(zhi)品(pin)、金(jin)屬制(zhi)品(pin)一般不(bu)可(ke)采(cai)用(yong)此方法滅(mie)(mie)菌。

6、化學試劑滅菌

通常用環(huan)氧(yang)乙烷殺菌，及各種消毒劑的(de)浸泡(pao)滅菌。環(huan)氧(yang)乙烷在平皿中曾經得到廣泛應(ying)用、對一次(ci)性(xing)醫療(liao)產品(pin)進行(xing)滅菌，卻因環(huan)境(jing)污染大，滅過菌后的(de)制品(pin)需要(yao)較長(chang)時間放置，讓環(huan)氧(yang)乙烷散去，目前已逐漸(jian)為其他滅菌方(fang)式所代替。

滅菌(jun)效(xiao)果：不同消(xiao)毒劑的(de)殺滅效(xiao)果是(shi)有(you)區別的(de)，粗略地(di)可以分為低效(xiao)消(xiao)毒劑、中(zhong)，高效(xiao)消(xiao)毒劑。環(huan)氧乙烷是(shi)一種高效(xiao)消(xiao)毒劑，能殺死(si)含(han)有(you)芽孢等一切(qie)微(wei)生(sheng)物(wu)。

注意事項：此類滅菌(jun)方(fang)式(shi)通(tong)常會有殘留，且對環境有污染，因此一般不適合用于直接進行(xing)微(wei)生物培(pei)養相關(guan)器皿滅菌(jun)；殺(sha)菌(jun)能力越強的消毒劑(ji)，刺激性、腐蝕性、毒性往往越大，使用時需注意防(fang)護。

二、培養基滅菌用哪種方法好

培養基(ji)的(de)滅菌方(fang)(fang)法(fa)眾多(duo)，采用(yong)不適(shi)當的(de)滅菌方(fang)(fang)法(fa)可能會破壞培養基(ji)的(de)質量(liang)，會改變(bian)顏色、透明度(du)降低、pH變(bian)化等，那(nei)么(me)哪種方(fang)(fang)法(fa)比較(jiao)好呢？

由于(yu)不(bu)同(tong)微生(sheng)物培養(yang)需要(yao)的(de)(de)培養(yang)基不(bu)同(tong)，滅(mie)菌(jun)(jun)方法的(de)(de)選(xuan)擇方面也(ye)有所不(bu)同(tong)，一般來(lai)說，培養(yang)基的(de)(de)滅(mie)菌(jun)(jun)方法應按照說明書或(huo)驗證試(shi)驗參數來(lai)采(cai)用(yong)不(bu)同(tong)方法，常規的(de)(de)是(shi)采(cai)用(yong)濕(shi)熱滅(mie)菌(jun)(jun)，特殊要(yao)求的(de)(de)采(cai)用(yong)薄膜過濾等。