一、培養基的種類有哪些
培養基(ji)是指供給微生(sheng)物、植(zhi)物或(huo)動物(或(huo)組織)生(sheng)長繁(fan)殖的,由不(bu)同營(ying)養物質組合(he)配制而成(cheng)的營(ying)養基(ji)質,它的種(zhong)類眾多,按照不(bu)同的分類方法可分為不(bu)同類型,一般主要有化(hua)學分類、物理分類和用途分類三種(zhong)分類方法:
1、化學分類
(1)天然培養基:天(tian)(tian)然培(pei)養(yang)(yang)基是指一類利用動物、植(zhi)物或微生(sheng)物體包(bao)括(kuo)其提(ti)取物制成(cheng)的(de)培(pei)養(yang)(yang)基。例如(ru)。牛肉膏蛋(dan)白(bai)胨培(pei)養(yang)(yang)基、麥芽汁(zhi)培(pei)養(yang)(yang)基和LB培(pei)養(yang)(yang)基等。常用的(de)天(tian)(tian)然有機營(ying)養(yang)(yang)物質包(bao)括(kuo)豆芽汁(zhi)、玉(yu)米粉(fen)、土壤浸(jin)液、麩(fu)皮、牛奶(nai)、血(xue)清、椰子汁(zhi)等。天(tian)(tian)然培(pei)養(yang)(yang)基成(cheng)本較低,除在(zai)實驗(yan)室經常使用外,也適于(yu)用來進行工(gong)業上大規模的(de)微生(sheng)物發酵生(sheng)產。
(2)組合培養(yang)基(ji)(ji):合成(cheng)(cheng)(cheng)培養(yang)基(ji)(ji)是根據(ju)天然(ran)培養(yang)基(ji)(ji)的(de)(de)(de)成(cheng)(cheng)(cheng)分,用(yong)化學物(wu)質(zhi)模擬(ni)合成(cheng)(cheng)(cheng)、人工(gong)設計而配制的(de)(de)(de)培養(yang)基(ji)(ji)。例如,高氏(shi)1號培養(yang)基(ji)(ji)和(he)查氏(shi)培養(yang)基(ji)(ji)等。合成(cheng)(cheng)(cheng)培養(yang)基(ji)(ji)有一(yi)定的(de)(de)(de)配方,配制合成(cheng)(cheng)(cheng)培養(yang)基(ji)(ji)時重(zhong)復性(xing)強,但與天然(ran)培養(yang)基(ji)(ji)相比(bi)其成(cheng)(cheng)(cheng)本較高,微(wei)生(sheng)物(wu)在(zai)其中生(sheng)長速度(du)較慢,一(yi)般適于在(zai)實驗(yan)室用(yong)來進(jin)行有關微(wei)生(sheng)物(wu)營養(yang)需求、代謝、分類鑒定、生(sheng)物(wu)量測定、菌種(zhong)選育及遺傳分析(xi)等方面(mian)的(de)(de)(de)研究工(gong)作。
(3)半組合培養(yang)(yang)基:指一類主要以化學(xue)試劑(ji)配(pei)制,同(tong)時(shi)還加(jia)有某種或(huo)某些(xie)天然成分的培養(yang)(yang)基。例如,馬鈴薯蔗(zhe)糖培養(yang)(yang)基。
2、物理分類
(1)液體培(pei)養(yang)(yang)基(ji):80%~90%是水,其中配有可(ke)溶性(xing)(xing)的或不溶性(xing)(xing)的營養(yang)(yang)成分的培(pei)養(yang)(yang)基(ji)。
(2)固(gu)體(ti)培養(yang)基:一類配(pei)制成的(de)(de)固(gu)體(ti)狀態的(de)(de)基質(zhi)。根據性質(zhi)又分(fen)為固(gu)化(hua)培養(yang)基、非可逆性固(gu)化(hua)培養(yang)基、天(tian)然固(gu)態培養(yang)基、濾膜。
(3)半固體(ti)培(pei)養基(ji)(ji):指在液體(ti)培(pei)養基(ji)(ji)中加入少量(liang)的凝固劑而配制成(cheng)的半固體(ti)狀態的培(pei)養基(ji)(ji)。
(4)脫水(shui)(shui)培養基(ji):又稱預制干燥(zao)培養基(ji),指含(han)有除水(shui)(shui)分外(wai)的一切成分的商品培養基(ji)。
3、用途分類
(1)基(ji)(ji)礎(chu)(chu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji):大多數(shu)微(wei)生物(wu)共(gong)同(tong)需要的(de)營養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)礎(chu)(chu)。某--微(wei)生物(wu)如有(you)特殊(shu)需要,可(ke)在此基(ji)(ji)礎(chu)(chu)上(shang)添(tian)加某種(zhong)成(cheng)分即可(ke),如蛋白(bai)(bai)胨(dong)水(shui)、肉(rou)湯培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)、營養(yang)(yang)(yang)瓊(qiong)脂(zhi)等。1%蛋白(bai)(bai)胨(dong)水(shui)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)便是一(yi)個最簡單的(de)基(ji)(ji)礎(chu)(chu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji),該基(ji)(ji)礎(chu)(chu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)本身可(ke)供一(yi)般(ban)細(xi)菌增(zeng)菌培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)和靛基(ji)(ji)質試驗用(yong),若(ruo)再加入指示(shi)劑和糖(tang)類(lei),則配成(cheng)糖(tang)發酵培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji),供糖(tang)發酵試驗用(yong),成(cheng)為(wei)(wei)鑒別(bie)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji);若(ruo)在1%蛋白(bai)(bai)胨(dong)水(shui)中增(zeng)加氯(lv)化鈉(na)用(yong)量并將(jiang)pH提高到8.6左右,則變(bian)成(cheng)堿性蛋白(bai)(bai)胨(dong)水(shui),用(yong)于霍亂弧菌的(de)增(zeng)菌培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang),成(cheng)為(wei)(wei)專用(yong)增(zeng)菌培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)。
(2)營養(yang)(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基:在(zai)基礎培(pei)養(yang)(yang)(yang)基中(zhong)添加(jia)(jia)一(yi)些特殊的(de)(de)營養(yang)(yang)(yang)物(wu)質,如葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏(gao)、生長(chang)因子等(deng),可供營養(yang)(yang)(yang)要求較高的(de)(de)細菌在(zai)其中(zhong)生長(chang)。例如鏈球菌、肺炎鏈球菌等(deng)需在(zai)含血液或(huo)血清的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基中(zhong)生長(chang);結核分枝桿菌的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基中(zhong)須添加(jia)(jia)雞蛋、馬鈴薯、甘(gan)油等(deng)。最常用的(de)(de)營養(yang)(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)(yang)基是血瓊脂(zhi)平板。
(3)增(zeng)菌(jun)培養基(ji):一般為(wei)液體培養基(ji),用于(yu)細菌(jun)的(de)增(zeng)菌(jun)培養,可(ke)泛(fan)用,也可(ke)專用,在專用增(zeng)菌(jun)培養基(ji)中(zhong)常含有(you)目(mu)的(de)菌(jun)生(sheng)長所需要的(de)特殊(shu)營(ying)養物質或生(sheng)長因子。
(4)選(xuan)擇性(xing)培(pei)養基:一類根據某微生物(wu)的(de)(de)特殊營(ying)養要求或(huo)其對某化學、物(wu)理因素(su)的(de)(de)抗性(xing)而設計的(de)(de)培(pei)養基,具有使混合菌(jun)樣中的(de)(de)劣勢(shi)菌(jun)變成優勢(shi)菌(jun)的(de)(de)功(gong)能,廣泛(fan)用于菌(jun)種篩選(xuan)等領(ling)域。
(5)鑒(jian)別(bie)培(pei)養(yang)基:一(yi)類在成(cheng)分中加(jia)有(you)能(neng)與目(mu)的菌的無色(se)代謝產物發(fa)生顯色(se)反應(ying)的指示(shi)劑,從而達到只須(xu)用肉(rou)眼辨別(bie)顏色(se)就能(neng)方便的從近似菌落中找出目(mu)的菌菌落的培(pei)養(yang)基。例(li)如,伊(yi)紅美藍(lan)乳糖(tang)培(pei)養(yang)基(EMB)。
(6)厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)培(pei)(pei)養(yang)基:供厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)的(de)(de)(de)(de)分(fen)離、培(pei)(pei)養(yang)和(he)鑒別用(yong)的(de)(de)(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)基,稱為厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)培(pei)(pei)養(yang)基。由(you)于(yu)厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)自(zi)身(shen)缺乏(fa)有(you)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)代(dai)謝(xie)所必需(xu)的(de)(de)(de)(de)各種(zhong)酶(mei)(mei)(mei),如細(xi)胞色素和(he)細(xi)胞色素氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)化酶(mei)(mei)(mei)、過(guo)(guo)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)化氫酶(mei)(mei)(mei)和(he)過(guo)(guo)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)化物酶(mei)(mei)(mei)、超(chao)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)化歧化酶(mei)(mei)(mei),所以造(zao)成自(zi)身(shen)代(dai)謝(xie)的(de)(de)(de)(de)缺陷(xian),無法進行有(you)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)代(dai)謝(xie),而無氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)酵解所產(chan)生的(de)(de)(de)(de)能量(liang)又(you)不足,因此厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)在正常的(de)(de)(de)(de)大氣環(huan)境下不能生長和(he)生存。為使(shi)厭(yan)氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)菌(jun)(jun)能正常生長,必須制備營養(yang)成分(fen)豐富,氧(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)化還原(yuan)電勢較低,具(ju)有(you)特殊生長因子的(de)(de)(de)(de)專用(yong)培(pei)(pei)養(yang)基。
(7)細胞(bao)培養基:是指(zhi)用于(yu)(yu)各(ge)(ge)種目(mu)的(de)(de)(de)(de)的(de)(de)(de)(de)體(ti)外培養、保存、運輸活組(zu)織、器(qi)官及(ji)細胞(bao)的(de)(de)(de)(de)液體(ti),實質為人工模擬(ni)體(ti)內生(sheng)長的(de)(de)(de)(de)營養環境(jing),使細胞(bao)在此環境(jing)中有生(sheng)長和繁(fan)殖的(de)(de)(de)(de)能(neng)力。由于(yu)(yu)其(qi)成分數量(liang)明確并可通過(guo)調節某一(yi)種成分來觀(guan)察被研究對象的(de)(de)(de)(de)各(ge)(ge)種生(sheng)物學改(gai)變,被廣泛應用于(yu)(yu)細胞(bao)生(sheng)物學科的(de)(de)(de)(de)研究。
二、如何選擇合適種類的培養基
對于微生(sheng)物的(de)培養,選擇合(he)適(shi)的(de)培養基(ji)是很重要的(de),現在對培養基(ji)的(de)選擇還沒有一(yi)個統一(yi)的(de)標準,不過有幾點建(jian)議可(ke)供(gong)參考:
1、建立某種微生(sheng)(sheng)物所用的培養(yang)基應該(gai)是培養(yang)這種微生(sheng)(sheng)物首選的培養(yang)基。可以查閱參考文獻(xian),或在購買微生(sheng)(sheng)物時咨詢。
2、其他實驗室慣用的培養基不妨一試,許(xu)多培養基可以適合多種微生物。
3、根據微生物的(de)特點、實驗(yan)的(de)需要(yao)來選擇培(pei)養基。如小鼠(shu)細胞株多選RPMI1640培(pei)養基。
4、用多(duo)種培(pei)養(yang)基(ji)(ji)培(pei)養(yang)目的微生物,觀(guan)(guan)察其(qi)生長狀態,可以用生長曲線、集(ji)落形成率(lv)等(deng)指標判斷,根據實驗結(jie)果選擇最佳培(pei)養(yang)基(ji)(ji),這(zhe)是最客觀(guan)(guan)的方法,但比(bi)較(jiao)繁瑣。