一、掃描電鏡樣品制備流程是什么

化學方法制備樣品(pin)的(de)程序(xu)通常是：清洗、化學固定、干燥、噴鍍金(jin)屬。

1、清洗：某(mou)些生(sheng)物(wu)(wu)材料表面常附血液(ye)(ye)、細胞碎片、消(xiao)化道(dao)內(nei)的(de)食(shi)物(wu)(wu)殘渣、細菌、淋巴液(ye)(ye)及(ji)粘液(ye)(ye)等異物(wu)(wu)，掩蓋著要(yao)觀察的(de)部位，因而(er)，需要(yao)在固(gu)定之前用生(sheng)理(li)鹽水(shui)或等滲緩(huan)沖液(ye)(ye)等把附著物(wu)(wu)清洗干凈。亦可用5%碳酸(suan)鈉沖洗或酶消(xiao)化法(fa)去除這些異物(wu)(wu)。

2、固定：通(tong)常采用(yong)醛類（主(zhu)要是(shi)(shi)戊二醛和(he)多(duo)聚甲(jia)醛）與四(si)氧(yang)(yang)化鋨(e)(e)雙(shuang)固(gu)定，也可(ke)用(yong)四(si)氧(yang)(yang)化鋨(e)(e)單固(gu)定。四(si)氧(yang)(yang)化鋨(e)(e)固(gu)定不僅可(ke)良(liang)好地(di)保存組織(zhi)細胞(bao)結構(gou)，而(er)且能增(zeng)加材(cai)料(liao)的導電(dian)(dian)(dian)性和(he)二次(ci)電(dian)(dian)(dian)子(zi)產(chan)額，提高掃描(miao)(miao)電(dian)(dian)(dian)子(zi)顯(xian)微圖象的質量。這對高分辨掃描(miao)(miao)電(dian)(dian)(dian)子(zi)顯(xian)微術(shu)是(shi)(shi)極端重要的。為增(zeng)強這種效果，可(ke)用(yong)四(si)氧(yang)(yang)化鋨(e)(e)-單寧(ning)酸或(huo)是(shi)(shi)四(si)氧(yang)(yang)化鋨(e)(e)-珠叉二胼等反(fan)復處理(li)材(cai)料(liao)，使其結合更多(duo)的重金屬鋨(e)(e)，這就是(shi)(shi)導電(dian)(dian)(dian)染色。

3、干燥：固(gu)定后通常采(cai)用臨(lin)(lin)界(jie)點(dian)干(gan)(gan)燥(zao)法。其(qi)原理是：適當選擇溫度(du)和(he)壓(ya)力，使液體(ti)達(da)到臨(lin)(lin)界(jie)狀(zhuang)態（液態和(he)氣相間(jian)界(jie)面消失），從而避免在(zai)干(gan)(gan)燥(zao)過程中(zhong)由水的表面張力所造成的樣(yang)品變形。對含(han)水生物材料直接進行臨(lin)(lin)界(jie)點(dian)干(gan)(gan)燥(zao)時，水的臨(lin)(lin)界(jie)溫度(du)和(he)壓(ya)力不能過高（37.4℃，218帕）。通常用乙醇或(huo)丙(bing)酮等使材料脫水，再(zai)用一種(zhong)中(zhong)間(jian)介質，如醋(cu)酸戊酯，置換脫水劑，然(ran)后在(zai)臨(lin)(lin)界(jie)點(dian)干(gan)(gan)燥(zao)器中(zhong)用液體(ti)或(huo)固(gu)體(ti)二氧化(hua)碳(tan)、氟利昂13以及一氧化(hua)二氮等置換劑置換中(zhong)間(jian)介質，進行臨(lin)(lin)界(jie)干(gan)(gan)燥(zao)。

4、噴鍍金屬：將干燥的(de)樣(yang)品(pin)(pin)用導(dao)電性好(hao)的(de)粘(zhan)合劑(ji)或其他粘(zhan)合劑(ji)粘(zhan)在金屬樣(yang)品(pin)(pin)臺上，然后放在真空蒸發器中噴鍍(du)(du)一(yi)層50～300埃厚的(de)金屬膜(mo)，以提高樣(yang)品(pin)(pin)的(de)導(dao)電性和(he)二(er)次(ci)電子產額(e)，改善圖象(xiang)質量，并且防止樣(yang)品(pin)(pin)受熱和(he)輻射損(sun)傷。如果采(cai)用離子濺(jian)射鍍(du)(du)膜(mo)機噴鍍(du)(du)金屬，可(ke)獲得均勻的(de)細顆粒薄金屬鍍(du)(du)層，提高掃描電子圖象(xiang)的(de)質量。

二、掃描電鏡樣品要求有哪些

前文已經簡單了解了掃描電鏡樣品制備流程，在制作的時候，我們要注意掃描電鏡對于樣品還有一定的要求：

1、樣品要盡可能干燥，若樣品中含有(you)水份，水分揮發(fa)會造成(cheng)倉內真空度急劇下降，導致圖(tu)像漂移(yi)，有(you)白色條紋，甚至會影(ying)響(xiang)燈絲壽命。

2、熱穩定性好，熱穩定(ding)性(xing)差的樣品往往在電(dian)子束(shu)的轟擊(ji)下分解，釋(shi)放氣體(ti)和其(qi)他(ta)物(wu)質(zhi)，污染電(dian)鏡。

3、導電性好，導電性差的樣品(pin)會發生荷電效應，造成圖(tu)像(xiang)(xiang)畸變，亮(liang)點亮(liang)線，像(xiang)(xiang)散等。

4、不含強磁性，強磁(ci)性(xing)的樣品(pin)觀(guan)察一般會出現(xian)嚴重的像(xiang)散(san)，無法消去，磁(ci)性(xing)粉末如果粘的不(bu)牢固還可能(neng)會吸附到探頭(tou)上(shang)，損害電鏡。