一、掃描電鏡樣品制備流程是什么

化(hua)學方法制備(bei)樣品的程序通常是：清(qing)洗、化(hua)學固定、干燥、噴鍍金屬。

1、清洗：某些生(sheng)物(wu)材料表(biao)面常附血液(ye)、細(xi)胞碎片、消化道內(nei)的食物(wu)殘渣、細(xi)菌、淋巴液(ye)及粘液(ye)等(deng)異物(wu)，掩蓋著要(yao)觀察的部位，因而，需要(yao)在(zai)固定之前(qian)用(yong)生(sheng)理鹽(yan)水(shui)或等(deng)滲緩沖液(ye)等(deng)把附著物(wu)清洗(xi)干(gan)凈。亦可用(yong)5%碳酸鈉沖洗(xi)或酶消化法去除這(zhe)些異物(wu)。

2、固定：通(tong)常采用(yong)醛(quan)類（主要(yao)是(shi)戊二(er)醛(quan)和(he)多(duo)聚甲醛(quan)）與四(si)氧(yang)(yang)化鋨(e)雙固(gu)(gu)定(ding)，也(ye)可用(yong)四(si)氧(yang)(yang)化鋨(e)單固(gu)(gu)定(ding)。四(si)氧(yang)(yang)化鋨(e)固(gu)(gu)定(ding)不僅可良好(hao)地保存(cun)組織細胞結構(gou)，而且能增加材(cai)料(liao)的(de)導電(dian)(dian)性和(he)二(er)次電(dian)(dian)子產額，提高(gao)掃描電(dian)(dian)子顯(xian)微圖(tu)象的(de)質量。這對高(gao)分辨掃描電(dian)(dian)子顯(xian)微術是(shi)極端(duan)重(zhong)要(yao)的(de)。為增強這種效果，可用(yong)四(si)氧(yang)(yang)化鋨(e)-單寧酸(suan)或是(shi)四(si)氧(yang)(yang)化鋨(e)-珠叉二(er)胼等(deng)反(fan)復處理材(cai)料(liao)，使其結合更多(duo)的(de)重(zhong)金屬鋨(e)，這就(jiu)是(shi)導電(dian)(dian)染色(se)。

3、干燥：固定后(hou)通常采用臨(lin)(lin)(lin)(lin)界(jie)點(dian)干(gan)燥(zao)(zao)法(fa)。其原理是：適當(dang)選擇溫度(du)和(he)壓力，使液(ye)體達到臨(lin)(lin)(lin)(lin)界(jie)狀態(tai)（液(ye)態(tai)和(he)氣相(xiang)間界(jie)面消失(shi)），從而避免(mian)在干(gan)燥(zao)(zao)過程中(zhong)(zhong)由水(shui)的表面張力所造成的樣品變形。對含水(shui)生(sheng)物材料(liao)直(zhi)接(jie)進(jin)行(xing)臨(lin)(lin)(lin)(lin)界(jie)點(dian)干(gan)燥(zao)(zao)時(shi)，水(shui)的臨(lin)(lin)(lin)(lin)界(jie)溫度(du)和(he)壓力不能過高（37.4℃，218帕）。通常用乙醇或(huo)丙酮(tong)等使材料(liao)脫水(shui)，再(zai)用一種中(zhong)(zhong)間介質，如醋(cu)酸(suan)戊酯(zhi)，置換(huan)(huan)脫水(shui)劑，然后(hou)在臨(lin)(lin)(lin)(lin)界(jie)點(dian)干(gan)燥(zao)(zao)器中(zhong)(zhong)用液(ye)體或(huo)固體二(er)氧(yang)(yang)化碳、氟利(li)昂13以及一氧(yang)(yang)化二(er)氮(dan)等置換(huan)(huan)劑置換(huan)(huan)中(zhong)(zhong)間介質，進(jin)行(xing)臨(lin)(lin)(lin)(lin)界(jie)干(gan)燥(zao)(zao)。

4、噴鍍金屬：將干燥的樣(yang)品用導(dao)電性好(hao)的粘(zhan)(zhan)合(he)劑(ji)或其(qi)他粘(zhan)(zhan)合(he)劑(ji)粘(zhan)(zhan)在(zai)金屬(shu)樣(yang)品臺上(shang)，然(ran)后(hou)放在(zai)真空蒸發器中噴鍍(du)一層(ceng)50～300埃厚(hou)的金屬(shu)膜，以提(ti)高(gao)樣(yang)品的導(dao)電性和(he)(he)二次電子(zi)產額，改(gai)善圖(tu)象質量，并(bing)且(qie)防止樣(yang)品受熱和(he)(he)輻射損傷。如果采用離(li)子(zi)濺射鍍(du)膜機噴鍍(du)金屬(shu)，可獲得(de)均勻的細顆粒薄金屬(shu)鍍(du)層(ceng)，提(ti)高(gao)掃描電子(zi)圖(tu)象的質量。

二、掃描電鏡樣品要求有哪些

前文已經簡單了解了掃描電鏡樣品制備流程，在制作的時候，我們要注意掃描電鏡對于(yu)樣品還有一定(ding)的要求：

1、樣品要盡可能干燥，若樣品中含有水份，水分揮發(fa)會造成(cheng)倉(cang)內真(zhen)空度急劇下降，導致(zhi)圖像(xiang)漂移，有白色(se)條紋，甚(shen)至會影響燈絲(si)壽命。

2、熱穩定性好，熱(re)穩定性差(cha)的(de)樣品往(wang)往(wang)在(zai)電(dian)子束(shu)的(de)轟擊下分解，釋放(fang)氣(qi)體(ti)和其(qi)他物質，污(wu)染電(dian)鏡。

3、導電性好，導電性差的樣品會發生荷電效應，造成圖(tu)像畸變，亮(liang)點亮(liang)線，像散等(deng)。

4、不含強磁性，強磁性的(de)(de)樣品觀察(cha)一般會出現嚴(yan)重(zhong)的(de)(de)像散，無法消去(qu)，磁性粉(fen)末如果粘的(de)(de)不牢固(gu)還可能(neng)會吸附(fu)到探頭上，損害電鏡。