一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么(me)呢?一起來看看吧(ba)!
首先(xian)先(xian)對流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)進行過濾(lv),根(gen)據需(xu)要(yao)選擇不同的(de)濾(lv)膜,一(yi)般(ban)為有機(ji)系和水系,常用的(de)孔徑為0.20um和0.45um。然后對抽濾(lv)后的(de)流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)進行超聲脫氣10-20分鐘。一(yi)般(ban)情(qing)況下(xia),流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)沖(chong)洗(xi)20-30分鐘后,儀器(qi)方可穩定,最重要(yao)的(de)是儀器(qi)基(ji)線走后,方可進樣測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動相必(bi)須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆(ke)粒性雜質和其他物質。
2、流動(dong)相過濾(lv)后(hou)(hou)(hou)要用超聲(sheng)波脫氣,脫氣后(hou)(hou)(hou)應(ying)該恢復到室溫(wen)后(hou)(hou)(hou)使用。
3、不能用純(chun)乙腈作為流動相,這樣會(hui)使單向(xiang)閥粘住而導(dao)致(zhi)泵不進液(ye)。
4、使(shi)用(yong)緩沖(chong)溶液時,做完樣品后(hou)應(ying)立即(ji)用(yong)去離(li)子水沖(chong)洗管路(lu)及柱子一小時,然(ran)后(hou)用(yong)甲醇沖(chong)洗40分(fen)鐘以上,以充分(fen)洗去離(li)子。對于柱塞桿外(wai)部,做完樣品后(hou)也必須用(yong)去離(li)子水沖(chong)洗。
5、長時間不用(yong)(yong)儀器,應該(gai)將柱子(zi)取(qu)下用(yong)(yong)堵頭封好保存,注意不能用(yong)(yong)純水(shui)保存柱子(zi),而應該(gai)用(yong)(yong)有(you)機(ji)相,因(yin)為純水(shui)易長霉。
6、每次做(zuo)完樣(yang)品后應該用(yong)溶(rong)解樣(yang)品的溶(rong)劑清洗(xi)進(jin)樣(yang)器。
7、C18柱絕對不能進蛋白樣品,血樣、生(sheng)物(wu)樣品。
8、堵(du)塞導(dao)致(zhi)壓力(li)太大(da),按預柱→混合器(qi)中的(de)過濾(lv)器(qi)→管(guan)路(lu)過濾(lv)器(qi)→單向閥檢查并清洗。
9、氣泡會致(zhi)使壓力不穩,重現性差,所以在使用(yong)過程中要盡量避免(mian)產生氣泡。
10、如果進液(ye)(ye)管內不進液(ye)(ye)體時,要(yao)使用注(zhu)射(she)器吸液(ye)(ye):通常在輸液(ye)(ye)前要(yao)進行流動相的清洗。
11、要注(zhu)意(yi)柱子的(de)pH值范圍,不得(de)注(zhu)射強酸強堿的(de)樣品(pin)(pin),特別是堿性樣品(pin)(pin)。
12、更換流(liu)動(dong)相時應(ying)該先將(jiang)吸濾頭部分放入燒杯(bei)中邊(bian)振動(dong)邊(bian)靖(jing)洗,然(ran)后插入新的(de)流(liu)動(dong)相中。更換無互溶性的(de)流(liu)動(dong)相時要用異丙醇過渡一下。