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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么(me)呢?一起來看看吧(ba)!

首先(xian)先(xian)對流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)進行過濾(lv),根(gen)據需(xu)要(yao)選擇不同的(de)濾(lv)膜,一(yi)般(ban)為有機(ji)系和水系,常用的(de)孔徑為0.20um和0.45um。然后對抽濾(lv)后的(de)流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)進行超聲脫氣10-20分鐘。一(yi)般(ban)情(qing)況下(xia),流(liu)動(dong)(dong)相(xiang)沖(chong)洗(xi)20-30分鐘后,儀器(qi)方可穩定,最重要(yao)的(de)是儀器(qi)基(ji)線走后,方可進樣測試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動相必(bi)須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆(ke)粒性雜質和其他物質。

2、流動(dong)相過濾(lv)后(hou)(hou)(hou)要用超聲(sheng)波脫氣,脫氣后(hou)(hou)(hou)應(ying)該恢復到室溫(wen)后(hou)(hou)(hou)使用。

3、不能用純(chun)乙腈作為流動相,這樣會(hui)使單向(xiang)閥粘住而導(dao)致(zhi)泵不進液(ye)。

4、使(shi)用(yong)緩沖(chong)溶液時,做完樣品后(hou)應(ying)立即(ji)用(yong)去離(li)子水沖(chong)洗管路(lu)及柱子一小時,然(ran)后(hou)用(yong)甲醇沖(chong)洗40分(fen)鐘以上,以充分(fen)洗去離(li)子。對于柱塞桿外(wai)部,做完樣品后(hou)也必須用(yong)去離(li)子水沖(chong)洗。

5、長時間不用(yong)(yong)儀器,應該(gai)將柱子(zi)取(qu)下用(yong)(yong)堵頭封好保存,注意不能用(yong)(yong)純水(shui)保存柱子(zi),而應該(gai)用(yong)(yong)有(you)機(ji)相,因(yin)為純水(shui)易長霉。

6、每次做(zuo)完樣(yang)品后應該用(yong)溶(rong)解樣(yang)品的溶(rong)劑清洗(xi)進(jin)樣(yang)器。

7、C18柱絕對不能進蛋白樣品,血樣、生(sheng)物(wu)樣品。

8、堵(du)塞導(dao)致(zhi)壓力(li)太大(da),按預柱→混合器(qi)中的(de)過濾(lv)器(qi)→管(guan)路(lu)過濾(lv)器(qi)→單向閥檢查并清洗。

9、氣泡會致(zhi)使壓力不穩,重現性差,所以在使用(yong)過程中要盡量避免(mian)產生氣泡。

10、如果進液(ye)(ye)管內不進液(ye)(ye)體時,要(yao)使用注(zhu)射(she)器吸液(ye)(ye):通常在輸液(ye)(ye)前要(yao)進行流動相的清洗。

11、要注(zhu)意(yi)柱子的(de)pH值范圍,不得(de)注(zhu)射強酸強堿的(de)樣品(pin)(pin),特別是堿性樣品(pin)(pin)。

12、更換流(liu)動(dong)相時應(ying)該先將(jiang)吸濾頭部分放入燒杯(bei)中邊(bian)振動(dong)邊(bian)靖(jing)洗,然(ran)后插入新的(de)流(liu)動(dong)相中。更換無互溶性的(de)流(liu)動(dong)相時要用異丙醇過渡一下。

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