一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高(gao)效(xiao)液(ye)相色譜儀(yi)（HPLC）和液(ye)相色譜儀(yi)（LC）都是使用(yong)液(ye)體(ti)移動相將樣品分(fen)(fen)離(li)(li)開來的(de)儀(yi)器。HPLC是在LC的(de)基礎上發展而來的(de)，在分(fen)(fen)離(li)(li)性能、分(fen)(fen)析效(xiao)率、檢測靈(ling)敏度等方面均(jun)有所提高(gao)。HPLC主要應用(yong)于有機化學、生化、藥學、環境(jing)分(fen)(fen)析等領(ling)域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖然高效液(ye)相色譜(pu)儀和液(ye)相色譜(pu)儀都屬于液(ye)相色譜(pu)儀類別，但它們在分離性能、分析效率、檢(jian)測靈敏度等方面均(jun)有所不同：

1、分離性能的區別

HPLC的分(fen)(fen)(fen)離(li)性能(neng)比LC更好，分(fen)(fen)(fen)離(li)效(xiao)率更高(gao)，分(fen)(fen)(fen)離(li)劑更多(duo)(duo)樣化(hua)。HPLC在柱(zhu)子填(tian)充材料和柱(zhu)子直徑等方面具有更多(duo)(duo)變化(hua)的選擇，可根據不同(tong)的樣品和要求設計出不同(tong)的柱(zhu)子，從而實現更好的分(fen)(fen)(fen)離(li)效(xiao)果。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更(geng)快(kuai)的(de)分(fen)析速度和更(geng)快(kuai)的(de)洗脫(tuo)速度，可以(yi)更(geng)快(kuai)地(di)得(de)到分(fen)離和檢測結果。此外，HPLC中使用(yong)的(de)柱子通(tong)常(chang)較長，能夠保證更(geng)高的(de)峰分(fen)辨率和更(geng)好的(de)分(fen)析效率。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的(de)(de)流動(dong)相(xiang)(xiang)流速更快(kuai)，反(fan)相(xiang)(xiang)柱分(fen)(fen)離更好，它(ta)能(neng)夠在較短的(de)(de)時間內，更準確(que)地檢測出細微的(de)(de)化學物(wu)質，與LC相(xiang)(xiang)比，更適用于高(gao)靈敏度(du)分(fen)(fen)析和有機化合物(wu)的(de)(de)分(fen)(fen)析。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀主要有(you)三類(lei)：正相(xiang)(xiang)高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀、反相(xiang)(xiang)高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀和超高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀（超高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀）。

1、盡管有(you)名稱，正(zheng)相(xiang)高效(xiao)(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)(yi)并不(bu)是最常(chang)用的高效(xiao)(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)(yi)方(fang)法。正(zheng)相(xiang)高效(xiao)(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)(yi)使用非(fei)極(ji)(ji)性(xing)溶劑作為流動相(xiang)，硅膠顆(ke)粒作為固定相(xiang)。在(zai)常(chang)規高效(xiao)(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)(yi)中(zhong)，與非(fei)極(ji)(ji)性(xing)化(hua)合物(wu)相(xiang)比，極(ji)(ji)性(xing)化(hua)合物(wu)在(zai)固定相(xiang)中(zhong)會更(geng)長時(shi)間地粘附在(zai)極(ji)(ji)性(xing)有(you)機硅上。因此，非(fei)極(ji)(ji)性(xing)化(hua)合物(wu)在(zai)正(zheng)常(chang)高效(xiao)(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)(yi)中(zhong)的洗脫(tuo)速度(du)更(geng)快。孔徑一般(ban)在(zai)3微米左右。

2、反相(xiang)高效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)是(shi)最常見的(de)(de)高效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)類型。在(zai)反相(xiang)高效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)中(zhong)，固(gu)定(ding)相(xiang)被烴(jing)鏈（通常長(chang)8-18個碳）改性(xing)(xing)，導致色譜(pu)(pu)柱(zhu)變為(wei)非(fei)極(ji)性(xing)(xing)。也(ye)使用極(ji)性(xing)(xing)溶(rong)劑。在(zai)反相(xiang)高效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)中(zhong)，樣品(pin)中(zhong)的(de)(de)極(ji)性(xing)(xing)分子會與溶(rong)劑產生強烈的(de)(de)吸引力，從而使它(ta)們更快地洗(xi)脫(tuo)。它(ta)們也(ye)不會與非(fei)極(ji)性(xing)(xing)固(gu)定(ding)相(xiang)相(xiang)互作用。非(fei)極(ji)性(xing)(xing)化合物會與固(gu)定(ding)相(xiang)產生范德(de)華力和分散相(xiang)互作用，因此它(ta)們的(de)(de)洗(xi)脫(tuo)速度較慢。

3、與高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀相比(bi)，超(chao)高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀運行速(su)度更(geng)快、使(shi)用的(de)溶(rong)劑更(geng)少且分辨率更(geng)高(gao)。色(se)譜(pu)(pu)柱(zhu)也(ye)更(geng)小(xiao)(xiao)，固(gu)定相顆粒的(de)尺(chi)寸要小(xiao)(xiao)得多。較(jiao)小(xiao)(xiao)的(de)孔(kong)（亞2微米(mi)）促進了分子更(geng)好的(de)分離和分辨率。較(jiao)短的(de)色(se)譜(pu)(pu)柱(zhu)還(huan)可以進行快速(su)檢(jian)測。然而，超(chao)高(gao)效(xiao)液(ye)(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀不能(neng)用于(yu)干燥或未過(guo)濾(lv)的(de)樣品，因(yin)為較(jiao)小(xiao)(xiao)的(de)孔(kong)會堵塞，這(zhe)是一個昂貴(gui)且耗(hao)時的(de)修復過(guo)程。