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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)效(xiao)液相色譜儀的顯著特征是高(gao)壓、高(gao)速、高(gao)效(xiao)、高(gao)靈敏度、高(gao)選(xuan)擇性(xing)和(he)應用范圍廣等(deng)。

1、高壓

高效液相(xiang)色譜儀為(wei)了獲得(de)高柱效,使用的固定(ding)相(xiang)粒徑很(hen)小(<10um),液體流動相(xiang)高速通過時,產生(sheng)很(hen)高的壓力,工作(zuo)壓力范圍為(wei)1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用(yong)了高(gao)壓,流(liu)動相(xiang)流(liu)速(su)快,所(suo)需的(de)分析(xi)時間比(bi)經典液相(xiang)柱色譜儀少(shao)得多。

3、高效

高效液相色譜儀的(de)柱(zhu)效能(neng)約3萬(wan)塔(ta)板/米(mi),氣相色(se)譜儀的(de)柱(zhu)效能(neng)約2000塔(ta)板/米(mi)。

4、高靈敏度

由(you)于采用了高靈敏度的檢測器,最小檢測量可達(da)10-9g,甚至10-11g,而所需樣品量很少。

5、高選擇性

可以通過控制流(liu)動相改善分離過程的選擇性。

6、應用范圍廣

高效(xiao)液相色(se)譜(pu)儀(yi)可(ke)用(yong)于(yu)高沸(fei)點、熱穩定性差以(yi)及具有(you)生(sheng)理活性物質(zhi)的分(fen)析。一般來說,沸(fei)點在450℃以(yi)下,相對分(fen)子質(zhi)量小于(yu)450的有(you)機(ji)物可(ke)用(yong)氣相色(se)譜(pu)儀(yi)分(fen)析,但這些物質(zhi)只占(zhan)有(you)機(ji)物的15%~20%,其(qi)余的80%~85%有(you)機(ji)物原則上可(ke)采用(yong)高效(xiao)液相色(se)譜(pu)儀(yi)分(fen)析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀(yi)(HPLC)是應用高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)原理,主要用于分(fen)(fen)析高(gao)沸點不(bu)(bu)易揮發的、受熱不(bu)(bu)穩定(ding)的和(he)分(fen)(fen)子量大的有(you)機化合(he)物的儀(yi)器(qi)設備。它由(you)儲液(ye)器(qi)、泵(beng)、進樣(yang)(yang)(yang)器(qi)、色(se)(se)譜(pu)柱(zhu)、檢測(ce)器(qi)、記錄(lu)儀(yi)等幾部分(fen)(fen)組成(cheng)。儲液(ye)器(qi)中的流動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)被高(gao)壓(ya)泵(beng)打(da)入(ru)系(xi)統,樣(yang)(yang)(yang)品溶(rong)液(ye)經進樣(yang)(yang)(yang)器(qi)進入(ru)流動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang),被流動(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)載入(ru)色(se)(se)譜(pu)柱(zhu)(固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang))內,由(you)于樣(yang)(yang)(yang)品溶(rong)液(ye)中的各組分(fen)(fen)在(zai)(zai)兩(liang)相(xiang)(xiang)(xiang)中具有(you)不(bu)(bu)同的分(fen)(fen)配系(xi)數,在(zai)(zai)兩(liang)相(xiang)(xiang)(xiang)中做(zuo)相(xiang)(xiang)(xiang)對(dui)運動(dong)(dong)時(shi),經過反復多次的吸附-解(jie)吸的分(fen)(fen)配過程,各組分(fen)(fen)在(zai)(zai)移動(dong)(dong)速度上產生較大的差別(bie),被分(fen)(fen)離成(cheng)單個組分(fen)(fen)依次從柱(zhu)內流出,通過檢測(ce)器(qi)時(shi),樣(yang)(yang)(yang)品濃度被轉(zhuan)換成(cheng)電信號傳送到記錄(lu)儀(yi),數據以圖譜(pu)形式打(da)印出來。

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