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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)(gao)(gao)效液相(xiang)色譜儀的顯(xian)著特(te)征是高(gao)(gao)(gao)壓、高(gao)(gao)(gao)速、高(gao)(gao)(gao)效、高(gao)(gao)(gao)靈(ling)敏度、高(gao)(gao)(gao)選擇性和應用范圍廣等(deng)。

1、高壓

高效液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀為了獲得高柱效,使用的(de)固定相(xiang)(xiang)粒徑很小(<10um),液體(ti)流動(dong)相(xiang)(xiang)高速通(tong)過時,產生很高的(de)壓力(li),工作(zuo)壓力(li)范圍(wei)為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用(yong)了高壓,流(liu)動相流(liu)速快,所需的(de)分析時間比經典(dian)液相柱(zhu)色(se)譜(pu)儀少(shao)得(de)多。

3、高效

高效液相色譜儀的(de)柱效能約3萬塔板/米(mi),氣相色(se)譜儀的(de)柱效能約2000塔板/米(mi)。

4、高靈敏度

由于采用了高靈(ling)敏度的檢測(ce)器,最(zui)小檢測(ce)量可達10-9g,甚至10-11g,而所需樣品(pin)量很少。

5、高選擇性

可以通過控制流動相改(gai)善(shan)分離(li)過程的選擇性。

6、應用范圍廣

高效(xiao)液相(xiang)色(se)譜儀(yi)(yi)可用(yong)(yong)于高沸點、熱穩定性差以及具有生理活(huo)性物(wu)質的分(fen)(fen)析。一般來說,沸點在450℃以下,相(xiang)對分(fen)(fen)子(zi)質量小于450的有機物(wu)可用(yong)(yong)氣相(xiang)色(se)譜儀(yi)(yi)分(fen)(fen)析,但這(zhe)些物(wu)質只占有機物(wu)的15%~20%,其(qi)余的80%~85%有機物(wu)原則(ze)上可采(cai)用(yong)(yong)高效(xiao)液相(xiang)色(se)譜儀(yi)(yi)分(fen)(fen)析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(HPLC)是(shi)應用(yong)(yong)高(gao)效(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)原理,主要用(yong)(yong)于分(fen)(fen)析(xi)高(gao)沸點不易揮發(fa)的(de)(de)、受熱不穩定的(de)(de)和(he)分(fen)(fen)子(zi)量大的(de)(de)有機(ji)化合物的(de)(de)儀器設備。它(ta)由儲液器、泵、進樣(yang)器、色譜(pu)柱(zhu)、檢(jian)測器、記(ji)錄儀等幾部分(fen)(fen)組成(cheng)。儲液器中的(de)(de)流動(dong)(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)被高(gao)壓泵打入(ru)系(xi)統(tong),樣(yang)品(pin)(pin)溶液經進樣(yang)器進入(ru)流動(dong)(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang),被流動(dong)(dong)(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)載入(ru)色譜(pu)柱(zhu)(固定相(xiang)(xiang)(xiang))內(nei),由于樣(yang)品(pin)(pin)溶液中的(de)(de)各(ge)組分(fen)(fen)在(zai)兩相(xiang)(xiang)(xiang)中具(ju)有不同的(de)(de)分(fen)(fen)配系(xi)數,在(zai)兩相(xiang)(xiang)(xiang)中做(zuo)相(xiang)(xiang)(xiang)對運動(dong)(dong)(dong)時,經過(guo)反復多次的(de)(de)吸附-解吸的(de)(de)分(fen)(fen)配過(guo)程,各(ge)組分(fen)(fen)在(zai)移動(dong)(dong)(dong)速度(du)(du)上產生較(jiao)大的(de)(de)差別(bie),被分(fen)(fen)離成(cheng)單個組分(fen)(fen)依次從(cong)柱(zhu)內(nei)流出(chu)(chu),通過(guo)檢(jian)測器時,樣(yang)品(pin)(pin)濃度(du)(du)被轉換成(cheng)電信(xin)號(hao)傳送到記(ji)錄儀,數據以圖譜(pu)形式打印出(chu)(chu)來。

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