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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀的顯著特征是高壓、高速、高效(xiao)、高靈(ling)敏度、高選擇性和(he)應(ying)用(yong)范圍廣等。

1、高壓

高效(xiao)液(ye)相色譜儀為了獲(huo)得高柱(zhu)效(xiao),使用的固定(ding)相粒(li)徑很小(<10um),液(ye)體流動相高速(su)通過時(shi),產(chan)生(sheng)很高的壓力(li),工作(zuo)壓力(li)范圍為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆(bian)用(yong)了高壓,流動相(xiang)流速快,所需的分析時間比(bi)經典液(ye)相(xiang)柱(zhu)色譜儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的(de)(de)柱效能(neng)約3萬(wan)塔板(ban)/米,氣相色譜儀的(de)(de)柱效能(neng)約2000塔板(ban)/米。

4、高靈敏度

由于采用(yong)了高靈敏度的檢測(ce)器,最(zui)小(xiao)檢測(ce)量(liang)可達10-9g,甚至10-11g,而所需樣品(pin)量(liang)很(hen)少。

5、高選擇性

可以(yi)通過控(kong)制(zhi)流(liu)動相改(gai)善(shan)分離過程(cheng)的選(xuan)擇性(xing)。

6、應用范圍廣

高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀可用于(yu)高沸(fei)(fei)點、熱穩(wen)定(ding)性(xing)差以(yi)及(ji)具(ju)有生理(li)活性(xing)物(wu)質(zhi)的分析。一般來(lai)說,沸(fei)(fei)點在450℃以(yi)下(xia),相(xiang)(xiang)對分子質(zhi)量小于(yu)450的有機(ji)(ji)物(wu)可用氣相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀分析,但這(zhe)些(xie)物(wu)質(zhi)只占有機(ji)(ji)物(wu)的15%~20%,其余的80%~85%有機(ji)(ji)物(wu)原(yuan)則上(shang)可采用高效液相(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀分析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(HPLC)是應用(yong)高效液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)原理,主要用(yong)于分(fen)(fen)(fen)析高沸點不(bu)易揮(hui)發的(de)(de)、受(shou)熱不(bu)穩定(ding)的(de)(de)和分(fen)(fen)(fen)子(zi)量大(da)的(de)(de)有機化合物的(de)(de)儀(yi)器(qi)(qi)設(she)備。它由儲(chu)液(ye)器(qi)(qi)、泵、進樣(yang)器(qi)(qi)、色(se)譜(pu)柱(zhu)(zhu)、檢測(ce)器(qi)(qi)、記錄(lu)儀(yi)等(deng)幾部(bu)分(fen)(fen)(fen)組(zu)(zu)成(cheng)。儲(chu)液(ye)器(qi)(qi)中(zhong)的(de)(de)流(liu)動(dong)相(xiang)被(bei)(bei)高壓泵打入系統,樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)經進樣(yang)器(qi)(qi)進入流(liu)動(dong)相(xiang),被(bei)(bei)流(liu)動(dong)相(xiang)載入色(se)譜(pu)柱(zhu)(zhu)(固定(ding)相(xiang))內(nei),由于樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)中(zhong)的(de)(de)各組(zu)(zu)分(fen)(fen)(fen)在(zai)兩相(xiang)中(zhong)具有不(bu)同的(de)(de)分(fen)(fen)(fen)配系數(shu)(shu),在(zai)兩相(xiang)中(zhong)做相(xiang)對運動(dong)時(shi),經過反復多次(ci)的(de)(de)吸(xi)附-解吸(xi)的(de)(de)分(fen)(fen)(fen)配過程,各組(zu)(zu)分(fen)(fen)(fen)在(zai)移動(dong)速度上產(chan)生較大(da)的(de)(de)差別,被(bei)(bei)分(fen)(fen)(fen)離成(cheng)單(dan)個組(zu)(zu)分(fen)(fen)(fen)依次(ci)從柱(zhu)(zhu)內(nei)流(liu)出,通過檢測(ce)器(qi)(qi)時(shi),樣(yang)品(pin)濃度被(bei)(bei)轉換成(cheng)電信號(hao)傳送到記錄(lu)儀(yi),數(shu)(shu)據(ju)以圖(tu)譜(pu)形式打印(yin)出來。

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