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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作(zuo)流程是什么呢?一起來看看吧!

首先(xian)先(xian)對流動相進行過濾,根據需(xu)要選擇不(bu)同的(de)濾膜,一般為有機(ji)系(xi)和水系(xi),常用的(de)孔徑為0.20um和0.45um。然后(hou)對抽(chou)濾后(hou)的(de)流動相進行超聲脫氣10-20分(fen)鐘。一般情況下,流動相沖(chong)洗20-30分(fen)鐘后(hou),儀(yi)器(qi)方(fang)可穩(wen)定,最重要的(de)是儀(yi)器(qi)基線走后(hou),方(fang)可進樣測試(shi)。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動相必(bi)須(xu)用HPLC級(ji)的試劑(ji),使用前過濾除去其(qi)中的顆(ke)粒性雜(za)質和其(qi)他物質。

2、流動相(xiang)過濾(lv)后要用超聲波(bo)脫(tuo)氣(qi),脫(tuo)氣(qi)后應(ying)該恢復(fu)到室溫后使(shi)用。

3、不(bu)能用(yong)純乙腈作為流動相,這樣會(hui)使單向閥粘住而導(dao)致泵不(bu)進液(ye)。

4、使用(yong)緩沖(chong)溶液時,做完樣品(pin)后應立即用(yong)去離子(zi)(zi)水沖(chong)洗管路及柱子(zi)(zi)一小(xiao)時,然后用(yong)甲醇(chun)沖(chong)洗40分(fen)鐘以上(shang),以充分(fen)洗去離子(zi)(zi)。對于柱塞桿外(wai)部,做完樣品(pin)后也必須用(yong)去離子(zi)(zi)水沖(chong)洗。

5、長(chang)時間不用(yong)儀(yi)器,應該將柱(zhu)子(zi)取(qu)下用(yong)堵(du)頭封好保存,注意(yi)不能用(yong)純水(shui)保存柱(zhu)子(zi),而應該用(yong)有機相,因為純水(shui)易(yi)長(chang)霉。

6、每次做(zuo)完(wan)樣品后應該(gai)用(yong)溶解樣品的溶劑清洗進樣器。

7、C18柱絕對不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。

8、堵塞導致(zhi)壓力太大,按(an)預(yu)柱→混合(he)器中的過(guo)濾器→管路(lu)過(guo)濾器→單向閥檢查并(bing)清洗。

9、氣泡(pao)(pao)會致使壓力不(bu)穩,重現性差,所(suo)以在使用(yong)過(guo)程中要(yao)盡(jin)量避免產生(sheng)氣泡(pao)(pao)。

10、如(ru)果進(jin)液(ye)(ye)管內(nei)不(bu)進(jin)液(ye)(ye)體時,要使用注射器(qi)吸液(ye)(ye):通(tong)常(chang)在輸(shu)液(ye)(ye)前要進(jin)行流動相的清洗。

11、要(yao)注意柱子的pH值范圍,不(bu)得注射強酸強堿的樣(yang)品,特(te)別是堿性樣(yang)品。

12、更換(huan)流動相時應該先(xian)將吸(xi)濾頭部分放入(ru)燒杯中邊振動邊靖洗,然(ran)后插入(ru)新的流動相中。更換(huan)無互溶性的流動相時要用異(yi)丙醇(chun)過渡一下。

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