一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是(shi)什么呢(ni)?一起來看看吧!
首先先對(dui)流動(dong)相進(jin)行過濾(lv)(lv),根據(ju)需要選(xuan)擇不(bu)同的(de)濾(lv)(lv)膜,一(yi)般(ban)為有機系和水系,常用的(de)孔徑為0.20um和0.45um。然后對(dui)抽濾(lv)(lv)后的(de)流動(dong)相進(jin)行超(chao)聲脫氣(qi)10-20分(fen)鐘。一(yi)般(ban)情況下,流動(dong)相沖洗20-30分(fen)鐘后,儀(yi)(yi)器方可穩定,最(zui)重要的(de)是儀(yi)(yi)器基線走后,方可進(jin)樣測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動(dong)相必須用HPLC級的試(shi)劑,使(shi)用前過濾除去(qu)其(qi)中(zhong)的顆粒性雜質和其(qi)他(ta)物質。
2、流動相過濾(lv)后(hou)(hou)要用超聲(sheng)波脫(tuo)(tuo)氣,脫(tuo)(tuo)氣后(hou)(hou)應該恢(hui)復到室溫后(hou)(hou)使用。
3、不能(neng)用純乙腈作(zuo)為流動(dong)相,這樣會(hui)使單向閥粘住而(er)導致泵不進液(ye)。
4、使用緩沖(chong)溶液(ye)時,做完樣(yang)品后(hou)應立即(ji)用去(qu)離子(zi)水沖(chong)洗(xi)管路及柱(zhu)子(zi)一小時,然(ran)后(hou)用甲醇(chun)沖(chong)洗(xi)40分鐘以上(shang),以充分洗(xi)去(qu)離子(zi)。對于柱(zhu)塞(sai)桿外部(bu),做完樣(yang)品后(hou)也必須用去(qu)離子(zi)水沖(chong)洗(xi)。
5、長時間不用儀器,應該(gai)將(jiang)柱(zhu)子取下用堵頭(tou)封好保存,注意不能用純(chun)水保存柱(zhu)子,而應該(gai)用有機相,因為純(chun)水易長霉(mei)。
6、每(mei)次做完樣品(pin)后應該用(yong)溶解樣品(pin)的溶劑清洗進樣器。
7、C18柱絕對不能進蛋(dan)白樣(yang)品,血(xue)樣(yang)、生(sheng)物樣(yang)品。
8、堵塞導(dao)致壓(ya)力太大,按預柱(zhu)→混合(he)器(qi)(qi)中(zhong)的過(guo)濾器(qi)(qi)→管路過(guo)濾器(qi)(qi)→單向(xiang)閥檢(jian)查并(bing)清洗。
9、氣(qi)泡(pao)會(hui)致使壓力不穩,重現性差,所以在使用(yong)過(guo)程中要盡量避免產生(sheng)氣(qi)泡(pao)。
10、如果進液(ye)管(guan)內(nei)不進液(ye)體(ti)時,要(yao)使用(yong)注射器(qi)吸液(ye):通常在輸(shu)液(ye)前要(yao)進行流動相的清洗(xi)。
11、要注(zhu)意柱子的pH值范(fan)圍(wei),不得(de)注(zhu)射強(qiang)酸強(qiang)堿的樣(yang)品,特(te)別(bie)是(shi)堿性(xing)樣(yang)品。
12、更換流動相(xiang)(xiang)時(shi)應該(gai)先將吸濾頭部分放入(ru)燒杯(bei)中邊(bian)振動邊(bian)靖洗,然后插入(ru)新(xin)的流動相(xiang)(xiang)中。更換無(wu)互溶性(xing)的流動相(xiang)(xiang)時(shi)要用異丙醇過渡一(yi)下。