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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是(shi)什么呢(ni)?一起來看看吧!

首先先對(dui)流動(dong)相進(jin)行過濾(lv)(lv),根據(ju)需要選(xuan)擇不(bu)同的(de)濾(lv)(lv)膜,一(yi)般(ban)為有機系和水系,常用的(de)孔徑為0.20um和0.45um。然后對(dui)抽濾(lv)(lv)后的(de)流動(dong)相進(jin)行超(chao)聲脫氣(qi)10-20分(fen)鐘。一(yi)般(ban)情況下,流動(dong)相沖洗20-30分(fen)鐘后,儀(yi)(yi)器方可穩定,最(zui)重要的(de)是儀(yi)(yi)器基線走后,方可進(jin)樣測試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動(dong)相必須用HPLC級的試(shi)劑,使(shi)用前過濾除去(qu)其(qi)中(zhong)的顆粒性雜質和其(qi)他(ta)物質。

2、流動相過濾(lv)后(hou)(hou)要用超聲(sheng)波脫(tuo)(tuo)氣,脫(tuo)(tuo)氣后(hou)(hou)應該恢(hui)復到室溫后(hou)(hou)使用。

3、不能(neng)用純乙腈作(zuo)為流動(dong)相,這樣會(hui)使單向閥粘住而(er)導致泵不進液(ye)。

4、使用緩沖(chong)溶液(ye)時,做完樣(yang)品后(hou)應立即(ji)用去(qu)離子(zi)水沖(chong)洗(xi)管路及柱(zhu)子(zi)一小時,然(ran)后(hou)用甲醇(chun)沖(chong)洗(xi)40分鐘以上(shang),以充分洗(xi)去(qu)離子(zi)。對于柱(zhu)塞(sai)桿外部(bu),做完樣(yang)品后(hou)也必須用去(qu)離子(zi)水沖(chong)洗(xi)。

5、長時間不用儀器,應該(gai)將(jiang)柱(zhu)子取下用堵頭(tou)封好保存,注意不能用純(chun)水保存柱(zhu)子,而應該(gai)用有機相,因為純(chun)水易長霉(mei)。

6、每(mei)次做完樣品(pin)后應該用(yong)溶解樣品(pin)的溶劑清洗進樣器。

7、C18柱絕對不能進蛋(dan)白樣(yang)品,血(xue)樣(yang)、生(sheng)物樣(yang)品。

8、堵塞導(dao)致壓(ya)力太大,按預柱(zhu)→混合(he)器(qi)(qi)中(zhong)的過(guo)濾器(qi)(qi)→管路過(guo)濾器(qi)(qi)→單向(xiang)閥檢(jian)查并(bing)清洗。

9、氣(qi)泡(pao)會(hui)致使壓力不穩,重現性差,所以在使用(yong)過(guo)程中要盡量避免產生(sheng)氣(qi)泡(pao)。

10、如果進液(ye)管(guan)內(nei)不進液(ye)體(ti)時,要(yao)使用(yong)注射器(qi)吸液(ye):通常在輸(shu)液(ye)前要(yao)進行流動相的清洗(xi)。

11、要注(zhu)意柱子的pH值范(fan)圍(wei),不得(de)注(zhu)射強(qiang)酸強(qiang)堿的樣(yang)品,特(te)別(bie)是(shi)堿性(xing)樣(yang)品。

12、更換流動相(xiang)(xiang)時(shi)應該(gai)先將吸濾頭部分放入(ru)燒杯(bei)中邊(bian)振動邊(bian)靖洗,然后插入(ru)新(xin)的流動相(xiang)(xiang)中。更換無(wu)互溶性(xing)的流動相(xiang)(xiang)時(shi)要用異丙醇過渡一(yi)下。

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