一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜儀（HPLC）和(he)液相(xiang)色譜儀（LC）都(dou)是使用液體移(yi)動相(xiang)將樣(yang)品分離開來的儀器。HPLC是在LC的基礎(chu)上(shang)發展而來的，在分離性(xing)能、分析(xi)效(xiao)率、檢測靈敏度等方面均有所提高(gao)。HPLC主要應用于(yu)有機化(hua)學、生化(hua)、藥學、環境(jing)分析(xi)等領域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖(sui)然高效液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)儀和液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)儀都屬于液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)儀類(lei)別，但(dan)它們在分(fen)離性能、分(fen)析(xi)效率、檢測靈敏度(du)等方面均有所(suo)不同：

1、分離性能的區別

HPLC的(de)分離(li)性(xing)能比LC更好，分離(li)效(xiao)率更高，分離(li)劑更多(duo)樣化(hua)。HPLC在柱(zhu)子(zi)填充材料和柱(zhu)子(zi)直徑等(deng)方(fang)面具(ju)有更多(duo)變(bian)化(hua)的(de)選擇，可根據(ju)不(bu)同的(de)樣品(pin)和要(yao)求(qiu)設計(ji)出不(bu)同的(de)柱(zhu)子(zi)，從而實(shi)現(xian)更好的(de)分離(li)效(xiao)果。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更快的(de)分(fen)析速度(du)和(he)(he)更快的(de)洗脫(tuo)速度(du)，可(ke)以更快地得(de)到分(fen)離(li)和(he)(he)檢測結(jie)果。此外，HPLC中使用的(de)柱子通常較長，能(neng)夠保證更高的(de)峰分(fen)辨(bian)率和(he)(he)更好的(de)分(fen)析效(xiao)率。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的(de)流(liu)動相(xiang)流(liu)速更快，反相(xiang)柱分(fen)離(li)更好，它(ta)能夠(gou)在較短的(de)時間內，更準確(que)地檢(jian)測出細微的(de)化學物質，與(yu)LC相(xiang)比，更適(shi)用于(yu)高靈敏度分(fen)析和(he)有機化合物的(de)分(fen)析。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)主(zhu)要有三(san)類：正相高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)、反相高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)和超(chao)高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)（超(chao)高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀(yi)）。

1、盡管有名稱，正相(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)并不是最常用(yong)的高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)方(fang)法(fa)。正相(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)使用(yong)非(fei)極(ji)性(xing)溶(rong)劑作為(wei)流動相(xiang)，硅膠顆粒作為(wei)固定相(xiang)。在(zai)(zai)(zai)(zai)常規高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)中(zhong)，與非(fei)極(ji)性(xing)化合物相(xiang)比，極(ji)性(xing)化合物在(zai)(zai)(zai)(zai)固定相(xiang)中(zhong)會更長(chang)時間地(di)粘附在(zai)(zai)(zai)(zai)極(ji)性(xing)有機硅上。因此，非(fei)極(ji)性(xing)化合物在(zai)(zai)(zai)(zai)正常高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)(pu)(pu)儀(yi)中(zhong)的洗脫速度(du)更快(kuai)。孔徑(jing)一般在(zai)(zai)(zai)(zai)3微米左(zuo)右(you)。

2、反相(xiang)高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)是最常見的高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)類型(xing)。在反相(xiang)高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)中，固定相(xiang)被(bei)烴鏈（通常長8-18個碳）改(gai)性(xing)(xing)，導致色譜(pu)柱變為非極(ji)性(xing)(xing)。也(ye)使用極(ji)性(xing)(xing)溶劑(ji)。在反相(xiang)高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)中，樣(yang)品中的極(ji)性(xing)(xing)分子會(hui)(hui)與溶劑(ji)產生(sheng)強烈的吸引力(li)，從而使它們(men)(men)更快地(di)洗脫。它們(men)(men)也(ye)不會(hui)(hui)與非極(ji)性(xing)(xing)固定相(xiang)相(xiang)互作用。非極(ji)性(xing)(xing)化(hua)合物會(hui)(hui)與固定相(xiang)產生(sheng)范德華力(li)和分散相(xiang)互作用，因此它們(men)(men)的洗脫速度較慢。

3、與(yu)高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀相比，超(chao)高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀運行速(su)度更(geng)快(kuai)、使用(yong)的溶(rong)劑(ji)更(geng)少(shao)且(qie)分(fen)(fen)辨率更(geng)高。色譜(pu)柱也更(geng)小，固定相顆粒(li)的尺寸要小得多。較(jiao)(jiao)小的孔(kong)（亞(ya)2微米）促進(jin)了(le)分(fen)(fen)子更(geng)好的分(fen)(fen)離和分(fen)(fen)辨率。較(jiao)(jiao)短的色譜(pu)柱還可以進(jin)行快(kuai)速(su)檢測。然(ran)而，超(chao)高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀不能用(yong)于干(gan)燥或未過濾的樣(yang)品，因為較(jiao)(jiao)小的孔(kong)會堵塞，這是一個昂貴且(qie)耗時的修復(fu)過程。