一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀（HPLC）和液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀（LC）都是使(shi)用液(ye)體(ti)移動相(xiang)(xiang)將樣(yang)品分(fen)(fen)離(li)開(kai)來的儀器。HPLC是在(zai)LC的基礎上發展而來的，在(zai)分(fen)(fen)離(li)性(xing)能(neng)、分(fen)(fen)析(xi)效(xiao)率、檢(jian)測(ce)靈敏度等(deng)方面均(jun)有所提(ti)高。HPLC主要應用于有機化學、生化、藥學、環境分(fen)(fen)析(xi)等(deng)領域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖(sui)然(ran)高效液(ye)(ye)相(xiang)色譜儀(yi)和液(ye)(ye)相(xiang)色譜儀(yi)都(dou)屬于液(ye)(ye)相(xiang)色譜儀(yi)類別，但它們(men)在分離性能、分析(xi)效率、檢測(ce)靈敏度等方面均有所不同(tong)：

1、分離性能的區別

HPLC的分(fen)離性能比(bi)LC更好(hao)，分(fen)離效率更高，分(fen)離劑更多樣(yang)化。HPLC在柱子填充材料和柱子直(zhi)徑等方面具(ju)有更多變化的選擇，可根(gen)據不(bu)同的樣(yang)品和要求設計出不(bu)同的柱子，從(cong)而實現更好(hao)的分(fen)離效果。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更(geng)(geng)(geng)快的分(fen)析(xi)速度(du)和更(geng)(geng)(geng)快的洗脫(tuo)速度(du)，可以(yi)更(geng)(geng)(geng)快地得到分(fen)離和檢測結果。此外(wai)，HPLC中使用的柱子通常較(jiao)長，能夠保(bao)證更(geng)(geng)(geng)高的峰(feng)分(fen)辨率和更(geng)(geng)(geng)好的分(fen)析(xi)效率。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的流動(dong)相(xiang)流速更(geng)快，反相(xiang)柱分離更(geng)好，它能夠在較(jiao)短(duan)的時間內，更(geng)準確地檢測(ce)出細微(wei)的化(hua)學物(wu)(wu)質，與LC相(xiang)比，更(geng)適用于高靈敏(min)度(du)分析和有機化(hua)合物(wu)(wu)的分析。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)主要有三類(lei)：正相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)、反(fan)相(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)和超高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)（超高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)）。

1、盡管有名稱，正相高效液相色(se)(se)(se)譜(pu)儀并不是最常用的(de)高效液相色(se)(se)(se)譜(pu)儀方法。正相高效液相色(se)(se)(se)譜(pu)儀使用非(fei)(fei)極(ji)(ji)性(xing)(xing)溶劑作為(wei)流動(dong)相，硅膠顆粒作為(wei)固定相。在(zai)(zai)常規高效液相色(se)(se)(se)譜(pu)儀中，與非(fei)(fei)極(ji)(ji)性(xing)(xing)化(hua)合物(wu)相比，極(ji)(ji)性(xing)(xing)化(hua)合物(wu)在(zai)(zai)固定相中會更(geng)長時(shi)間地粘附(fu)在(zai)(zai)極(ji)(ji)性(xing)(xing)有機(ji)硅上。因此，非(fei)(fei)極(ji)(ji)性(xing)(xing)化(hua)合物(wu)在(zai)(zai)正常高效液相色(se)(se)(se)譜(pu)儀中的(de)洗(xi)脫速(su)度更(geng)快。孔徑一般在(zai)(zai)3微米(mi)左右。

2、反相(xiang)(xiang)高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)是最常(chang)見(jian)的(de)高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)類型。在(zai)(zai)反相(xiang)(xiang)高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)中(zhong)，固定(ding)相(xiang)(xiang)被烴(jing)鏈(lian)（通常(chang)長8-18個(ge)碳）改性(xing)，導致色(se)譜柱變(bian)為非極(ji)(ji)性(xing)。也使用極(ji)(ji)性(xing)溶(rong)劑。在(zai)(zai)反相(xiang)(xiang)高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)中(zhong)，樣品中(zhong)的(de)極(ji)(ji)性(xing)分子(zi)會(hui)與溶(rong)劑產(chan)生強烈(lie)的(de)吸引力(li)，從而使它(ta)們更快地洗脫。它(ta)們也不會(hui)與非極(ji)(ji)性(xing)固定(ding)相(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)互作(zuo)用。非極(ji)(ji)性(xing)化合物(wu)會(hui)與固定(ding)相(xiang)(xiang)產(chan)生范德華力(li)和分散相(xiang)(xiang)互作(zuo)用，因此它(ta)們的(de)洗脫速度較慢。

3、與高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)相(xiang)比，超(chao)高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)運行(xing)(xing)速度更(geng)快(kuai)、使用(yong)的(de)溶劑(ji)更(geng)少(shao)且(qie)(qie)分(fen)辨率更(geng)高(gao)。色譜(pu)柱也更(geng)小，固定相(xiang)顆粒的(de)尺寸要小得多。較(jiao)小的(de)孔(kong)(kong)（亞2微米）促進了分(fen)子更(geng)好的(de)分(fen)離(li)和分(fen)辨率。較(jiao)短的(de)色譜(pu)柱還可以進行(xing)(xing)快(kuai)速檢測。然而，超(chao)高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)色譜(pu)儀(yi)不能用(yong)于(yu)干燥或未過濾的(de)樣品，因為(wei)較(jiao)小的(de)孔(kong)(kong)會堵塞(sai)，這(zhe)是一個昂貴且(qie)(qie)耗時的(de)修復過程。