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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高效液相色譜儀的顯著(zhu)特征是高壓、高速、高效、高靈敏(min)度、高選擇性和應用(yong)范圍廣等。

1、高壓

高效液(ye)相色譜(pu)儀為(wei)了(le)獲得高柱效,使用的(de)固定相粒徑很小(<10um),液(ye)體(ti)流(liu)動相高速通過時,產生很高的(de)壓力,工作壓力范圍為(wei)1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用了高壓,流(liu)動(dong)相流(liu)速快(kuai),所需的分析時(shi)間(jian)比經典液相柱色(se)譜(pu)儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱(zhu)(zhu)效(xiao)能約3萬塔(ta)板/米(mi),氣相色(se)譜儀的柱(zhu)(zhu)效(xiao)能約2000塔(ta)板/米(mi)。

4、高靈敏度

由于采用了高靈敏度的檢(jian)測(ce)器(qi),最小檢(jian)測(ce)量(liang)可達10-9g,甚至10-11g,而(er)所需樣品量(liang)很少(shao)。

5、高選擇性

可(ke)以(yi)通過控制流動(dong)相改善(shan)分離過程的選擇性。

6、應用范圍廣

高效液(ye)相色譜(pu)儀可(ke)(ke)用(yong)(yong)于高沸點(dian)、熱穩定性(xing)差以及(ji)具有(you)生理活性(xing)物(wu)質(zhi)的分析。一般來說,沸點(dian)在450℃以下,相對分子質(zhi)量小于450的有(you)機物(wu)可(ke)(ke)用(yong)(yong)氣相色譜(pu)儀分析,但這些物(wu)質(zhi)只占有(you)機物(wu)的15%~20%,其余的80%~85%有(you)機物(wu)原則上可(ke)(ke)采用(yong)(yong)高效液(ye)相色譜(pu)儀分析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高效液相(xiang)色譜儀(yi)(HPLC)是應(ying)用高效液相(xiang)色譜原(yuan)理,主(zhu)要用于分(fen)析高沸(fei)點不(bu)易(yi)揮(hui)發的(de)(de)(de)、受熱不(bu)穩定(ding)的(de)(de)(de)和分(fen)子量大的(de)(de)(de)有機(ji)化(hua)合物的(de)(de)(de)儀(yi)器設備。它由(you)儲液器、泵、進(jin)(jin)樣(yang)(yang)器、色譜柱、檢(jian)(jian)測器、記錄儀(yi)等(deng)幾部分(fen)組(zu)成。儲液器中(zhong)的(de)(de)(de)流動(dong)相(xiang)被(bei)(bei)高壓泵打(da)入系統(tong),樣(yang)(yang)品(pin)溶(rong)液經(jing)進(jin)(jin)樣(yang)(yang)器進(jin)(jin)入流動(dong)相(xiang),被(bei)(bei)流動(dong)相(xiang)載入色譜柱(固定(ding)相(xiang))內,由(you)于樣(yang)(yang)品(pin)溶(rong)液中(zhong)的(de)(de)(de)各組(zu)分(fen)在(zai)兩相(xiang)中(zhong)具有不(bu)同(tong)的(de)(de)(de)分(fen)配(pei)(pei)系數(shu),在(zai)兩相(xiang)中(zhong)做相(xiang)對運(yun)動(dong)時(shi),經(jing)過(guo)反復多次的(de)(de)(de)吸附-解(jie)吸的(de)(de)(de)分(fen)配(pei)(pei)過(guo)程(cheng),各組(zu)分(fen)在(zai)移動(dong)速度上產(chan)生較大的(de)(de)(de)差別,被(bei)(bei)分(fen)離成單(dan)個組(zu)分(fen)依(yi)次從柱內流出(chu),通過(guo)檢(jian)(jian)測器時(shi),樣(yang)(yang)品(pin)濃(nong)度被(bei)(bei)轉換成電信號傳送到記錄儀(yi),數(shu)據以圖譜形式打(da)印出(chu)來(lai)。

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