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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高效液相色(se)譜儀的顯著特征是高壓、高速、高效、高靈敏(min)度、高選擇性(xing)和(he)應(ying)用范圍(wei)廣等(deng)。

1、高壓

高(gao)效(xiao)液相(xiang)色(se)譜儀為(wei)了(le)獲得(de)高(gao)柱(zhu)效(xiao),使用(yong)的固定相(xiang)粒徑很小(<10um),液體流動(dong)相(xiang)高(gao)速通過時,產生很高(gao)的壓(ya)力,工作(zuo)壓(ya)力范圍為(wei)1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆(bian)用了高壓,流(liu)動(dong)相(xiang)流(liu)速快,所(suo)需的分析時間比經典液相(xiang)柱(zhu)色譜儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱效能(neng)約(yue)3萬(wan)塔(ta)板(ban)/米,氣相色譜儀的柱效能(neng)約(yue)2000塔(ta)板(ban)/米。

4、高靈敏度

由于采用了高靈敏度(du)的檢測器(qi),最(zui)小檢測量可(ke)達(da)10-9g,甚(shen)至10-11g,而所需樣(yang)品量很少。

5、高選擇性

可以通過控制(zhi)流動相改善分離過程(cheng)的選擇性。

6、應用范圍廣

高效液相(xiang)(xiang)色(se)譜儀可用于高沸點、熱(re)穩定性(xing)差以(yi)及具有(you)(you)生理活性(xing)物質(zhi)(zhi)的(de)(de)分(fen)(fen)析(xi)。一般來說(shuo),沸點在450℃以(yi)下(xia),相(xiang)(xiang)對分(fen)(fen)子質(zhi)(zhi)量小于450的(de)(de)有(you)(you)機物可用氣相(xiang)(xiang)色(se)譜儀分(fen)(fen)析(xi),但這些(xie)物質(zhi)(zhi)只占有(you)(you)機物的(de)(de)15%~20%,其余的(de)(de)80%~85%有(you)(you)機物原則(ze)上可采用高效液相(xiang)(xiang)色(se)譜儀分(fen)(fen)析(xi)。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀(HPLC)是應用高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜原理,主要用于分(fen)(fen)析高(gao)(gao)沸點不易揮發(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)、受熱不穩定(ding)的(de)(de)(de)(de)(de)和分(fen)(fen)子量大(da)的(de)(de)(de)(de)(de)有機化合物的(de)(de)(de)(de)(de)儀器設備(bei)。它由(you)儲(chu)液(ye)器、泵、進樣(yang)器、色(se)譜柱、檢(jian)測(ce)器、記(ji)錄儀等幾部(bu)分(fen)(fen)組成。儲(chu)液(ye)器中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)流(liu)動相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)被(bei)高(gao)(gao)壓泵打(da)入(ru)(ru)系統,樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)經(jing)進樣(yang)器進入(ru)(ru)流(liu)動相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang),被(bei)流(liu)動相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)載入(ru)(ru)色(se)譜柱(固(gu)定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang))內(nei),由(you)于樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)各組分(fen)(fen)在(zai)兩相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)具(ju)有不同(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)配(pei)系數,在(zai)兩相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)做相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)對運動時(shi)(shi),經(jing)過反復多(duo)次(ci)(ci)的(de)(de)(de)(de)(de)吸附-解吸的(de)(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)配(pei)過程,各組分(fen)(fen)在(zai)移(yi)動速度上(shang)產生較(jiao)大(da)的(de)(de)(de)(de)(de)差(cha)別,被(bei)分(fen)(fen)離成單個組分(fen)(fen)依次(ci)(ci)從柱內(nei)流(liu)出(chu),通過檢(jian)測(ce)器時(shi)(shi),樣(yang)品(pin)濃度被(bei)轉換成電信號傳(chuan)送到(dao)記(ji)錄儀,數據以圖譜形式(shi)打(da)印出(chu)來(lai)。

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