一、熒光酶標儀和普通酶標儀的區別在哪里
熒光酶標儀和普通酶標儀兩者(zhe)最大的區別就是(shi)原理(li)的不同。
1、熒光酶標儀
由(you)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)源氙弧燈發(fa)(fa)出(chu)(chu)的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)通過切光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)器(qi)(qi)(qi)使其(qi)變成(cheng)(cheng)斷(duan)續之光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)以及激(ji)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)(qi)變成(cheng)(cheng)單(dan)(dan)色(se)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)后(hou),此光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)即(ji)為熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)物質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)激(ji)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang),被測的(de)(de)(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)物質(zhi)(zhi)在(zai)激(ji)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)照射下所(suo)發(fa)(fa)出(chu)(chu)的(de)(de)(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang),經(jing)(jing)過單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)(qi)變成(cheng)(cheng)單(dan)(dan)色(se)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)后(hou)照射于(yu)測樣品用的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)電倍增管(guan)上(shang),由(you)其(qi)所(suo)發(fa)(fa)生(sheng)的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)電流(liu)經(jing)(jing)過放(fang)大器(qi)(qi)(qi)放(fang)大輸至(zhi)記(ji)(ji)錄儀,激(ji)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)(qi)和熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)(qi)的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)柵均由(you)電動(dong)機帶動(dong)的(de)(de)(de)(de)凸輪(lun)所(suo)控制,當測繪熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)發(fa)(fa)射光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜時,將激(ji)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)(qi)的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)柵,固(gu)定(ding)在(zai)最適當的(de)(de)(de)(de)激(ji)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)波(bo)長處,而讓(rang)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)(dan)色(se)器(qi)(qi)(qi)凸輪(lun)轉動(dong),將各波(bo)長的(de)(de)(de)(de)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)強度訊號輸出(chu)(chu)至(zhi)記(ji)(ji)錄儀上(shang),所(suo)記(ji)(ji)錄的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜即(ji)發(fa)(fa)射光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜。
當測(ce)繪熒光(guang)激(ji)(ji)發(fa)光(guang)譜時,將(jiang)(jiang)熒光(guang)單色器的光(guang)柵(zha)固定在最適當的熒光(guang)波長(chang)處,只(zhi)讓激(ji)(ji)發(fa)光(guang)單色口(kou)的凸輪轉動,將(jiang)(jiang)各波長(chang)的激(ji)(ji)發(fa)光(guang)的強度訊(xun)號輸(shu)出至(zhi)記(ji)錄(lu)儀(yi),所記(ji)錄(lu)的光(guang)譜即激(ji)(ji)發(fa)。
當進行樣品溶液的(de)定(ding)量分析時,將激(ji)發(fa)光(guang)單色器固(gu)定(ding)在(zai)所選擇(ze)的(de)激(ji)發(fa)光(guang)波(bo)長處,將熒(ying)光(guang)單色器調節至(zhi)所選擇(ze)的(de)熒(ying)光(guang)波(bo)長處,由記錄儀得出的(de)信號是樣品溶液的(de)熒(ying)光(guang)強度(du)。
2、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
光(guang)(guang)是(shi)電磁(ci)波(bo),波(bo)長100nm~400nm稱為紫(zi)外光(guang)(guang),400nm~780nm之間(jian)的光(guang)(guang)可(ke)被(bei)人眼(yan)觀察到,大(da)于780nm稱為紅外光(guang)(guang)。光(guang)(guang)吸收酶標儀測定的原理是(shi)在特定波(bo)長下,檢(jian)測被(bei)測物吸光(guang)(guang)值。
光通過被(bei)(bei)檢(jian)測物(wu),前后的(de)(de)能(neng)量差異即是被(bei)(bei)檢(jian)測物(wu)吸收掉(diao)的(de)(de)能(neng)量,特定波長(chang)下,同一種被(bei)(bei)檢(jian)測物(wu)的(de)(de)濃度與(yu)被(bei)(bei)吸收的(de)(de)能(neng)量成定量關系。
檢(jian)測單位用(yong)OD值表(biao)示,OD是(shi)opticaldelnsity(光(guang)(guang)密(mi)度(du)(du))的(de)縮寫,表(biao)示被檢(jian)測物吸收掉的(de)光(guang)(guang)密(mi)度(du)(du),OD=1og(1/trans),其中(zhong)trans為(wei)檢(jian)測物的(de)透光(guang)(guang)值。根據(ju)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光(guang)(guang)強(qiang)(qiang)度(du)(du)成下述關系:E=OD=logΙ0/Ι其中(zhong)E表(biao)示被吸收的(de)光(guang)(guang)密(mi)度(du)(du),Ι0為(wei)在檢(jian)測物之前的(de)光(guang)(guang)強(qiang)(qiang)度(du)(du),Ι為(wei)從被檢(jian)測物出來的(de)光(guang)(guang)強(qiang)(qiang)度(du)(du)。
二、熒光酶標儀和普通酶標儀哪個更好
前(qian)文已經簡(jian)單了解到了熒光酶標(biao)儀(yi)和普通(tong)酶標(biao)儀(yi)的區(qu)別在(zai)哪里(li),那(nei)么在(zai)選擇的時候,熒光酶標(biao)儀(yi)和普通(tong)酶標(biao)儀(yi)哪個更好呢?
1、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
優點(dian):檢(jian)測檢(jian)測技(ji)術成熟,成本低(di),操作簡單。
缺(que)點:動態范圍窄,靈(ling)敏度比較低,特異性不(bu)強。
2、熒光酶標儀
優點:靈敏度高,可實時檢測(ce),使用方(fang)便,檢測(ce)模式多樣。
缺點:易受外界(jie)干擾,激發(fa)光與(yu)發(fa)射光容易互(hu)相影響。
因(yin)此,兩者比(bi)較(jiao)起(qi)來,各有自己的優(you)缺(que)點,根據自己的實際(ji)情況進行選擇即(ji)可。