一、apoe基因檢測是什么意思

APOE基因檢測，又稱載脂蛋白E基因檢測，APOE是(shi)(shi)apolipoprotein E的(de)縮(suo)寫(xie)，翻譯過(guo)(guo)來就是(shi)(shi)載脂(zhi)蛋(dan)(dan)白E，它是(shi)(shi)一(yi)種多態性蛋(dan)(dan)白，參與脂(zhi)蛋(dan)(dan)白的(de)轉化與代謝過(guo)(guo)程，其(qi)基因(yin)可以調節許多生物學(xue)(xue)功能，與許多眼(yan)科疾病發病有關，對ApoE及(ji)其(qi)基因(yin)多態性的(de)研(yan)(yan)究是(shi)(shi)醫學(xue)(xue)研(yan)(yan)究的(de)熱點之一(yi)，探討兩者之間的(de)內在聯系，對眼(yan)病的(de)預防、診(zhen)斷(duan)及(ji)治療具(ju)有重要(yao)的(de)臨床應用價值(zhi)。

二、APOE基因檢測的意義

在(zai)臨床上(shang)(shang)通過APOE基因檢(jian)測主要是針對于(yu)載(zai)脂蛋(dan)白e基因的(de)檢(jian)測，一般可將患者分為(wei)E2、E3、E4三(san)個(ge)表現(xian)型，每個(ge)表現(xian)型在(zai)不同(tong)的(de)疾病的(de)發生率(lv)上(shang)(shang)都有(you)不同(tong)的(de)特點。

我國(guo)大(da)多數人群屬于(yu)(yu)E3表現(xian)型，屬于(yu)(yu)相(xiang)對(dui)(dui)較為均衡(heng)的(de)類型。E4表現(xian)型患者出(chu)現(xian)動(dong)脈(mo)粥(zhou)樣(yang)硬化(hua)(hua)、冠狀動(dong)脈(mo)粥(zhou)樣(yang)硬化(hua)(hua)性(xing)(xing)心臟病(bing)和癡呆(dai)的(de)風險(xian)相(xiang)對(dui)(dui)比較低，黃斑變性(xing)(xing)導致視力(li)損害的(de)可能性(xing)(xing)相(xiang)對(dui)(dui)較高。E2表現(xian)型患者幾乎(hu)不太可能出(chu)現(xian)黃斑變性(xing)(xing)，但(dan)是出(chu)現(xian)癡呆(dai)和冠心病(bing)的(de)風險(xian)相(xiang)對(dui)(dui)反而過(guo)高。

三、APOE基因檢測的方法

APOE基因檢測既可以以VLDL為樣(yang)品(pin)，又可以直(zhi)接以血(xue)清（或(huo)血(xue)漿）為樣(yang)品(pin)，通(tong)過IEF電(dian)泳分析、雙向PAGE或(huo)結合免疫印(yin)跡法進行測定：

1、等電聚焦法（IEF）

由于三(san)種主要ApoE異(yi)構(gou)(gou)體E2、E3和E4的(de)等(deng)電點（pⅠ）分別為5.89、6.02和6.68，E4比(bi)E3多一(yi)個正電荷，而E2比(bi)E3少一(yi)個正電荷。因此，可(ke)應用1EF檢測這些異(yi)構(gou)(gou)體間電荷差異(yi)而確定(ding)不(bu)同ApoE表型。傳(chuan)統(tong)ApoE表型檢測方法(fa)多采(cai)用超速(su)離(li)(li)心(xin)法(fa)或化學沉淀法(fa)分離(li)(li)VLDL，脫脂后進(jin)行IEF，然(ran)后進(jin)行染色(se)分析。這種方法(fa)需要血清量較多，昂貴(gui)、費時，又(you)需要大(da)型設備(bei)，不(bu)適合大(da)規模研(yan)究。ApoE異(yi)構(gou)(gou)體之間染色(se)程度之間差異(yi)及電泳(yong)過程中泳(yong)動(dong)距離(li)(li)的(de)變異(yi)性(xing)也造成(cheng)結果的(de)不(bu)穩定(ding)性(xing)。

2、雙相電泳法（two-dimensional electrophoresis）

第一相應用IEF電(dian)泳將等電(dian)點不同(tong)的蛋白質分(fen)離；第二相根據(ju)蛋白質分(fen)子(zi)量(liang)(liang)不同(tong)及濃度(du)的差(cha)異，應用SDS-PAGE進行分(fen)離，由此(ci)確(que)定ApoE表型。此(ci)技術能(neng)解決IEF遇到的一些轉錄后修飾的問題，臨(lin)(lin)床(chuang)標本用量(liang)(liang)也很少(shao)，并且可以同(tong)時進行定性和(he)定量(liang)(liang)分(fen)析，但(dan)由于成本昂貴而(er)且費時，有(you)時也難以清(qing)晰地分(fen)辨(bian)表型，故臨(lin)(lin)床(chuang)上應用較少(shao)。

3、免疫印跡法（immunoblotting）

血清脫脂后，經IEF電泳將(jiang)ApoE與其他(ta)蛋(dan)白(bai)質(zhi)分離(li)，然后將(jiang)凝膠(jiao)中(zhong)蛋(dan)白(bai)質(zhi)轉(zhuan)移到硝酸(suan)纖維素（NC）膜上，用(yong)抗(kang)ApoE抗(kang)體(ti)(ti)作為一抗(kang)進行免疫印跡反應或(huo)采用(yong)直接的(de)免疫固定(ding)法(fa)，即可靈敏而特(te)異地顯示(shi)出ApoE區帶的(de)位(wei)置，從而確定(ding)ApoE表型(xing)。此(ci)(ci)方法(fa)利(li)用(yong)抗(kang)原-抗(kang)體(ti)(ti)的(de)特(te)異反應，排除了(le)血清其他(ta)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)干擾(rao)，不需(xu)超速離(li)心分離(li)VLDL，血清用(yong)量少(shao)，是國內(nei)外實驗室(shi)檢(jian)測ApoE表型(xing)常用(yong)的(de)方法(fa)之一。但此(ci)(ci)類方法(fa)亦存在一些(xie)缺(que)點，如對于存在與普遍異構體(ti)(ti)具有(you)相同電荷的(de)罕見(jian)異構體(ti)(ti)標本，或(huo)在糖尿病等病理狀態時，由(you)于轉(zhuan)錄后修飾引(yin)起蛋(dan)白(bai)質(zhi)變化(hua)的(de)標本檢(jian)測時，就會(hui)給出錯誤的(de)結果。