一、免疫診斷原理有哪幾種

免疫診(zhen)斷(duan)(duan)是應用免疫學(xue)的(de)理論、技(ji)術和(he)方法診(zhen)斷(duan)(duan)各種疾(ji)病和(he)測定免疫狀態的(de)診(zhen)斷(duan)(duan)方法，目前免疫診(zhen)斷(duan)(duan)的(de)平臺和(he)方法有(you)多種多樣(yang)，但是都基于相同(tong)或相似的(de)原(yuan)理，主(zhu)要有(you)五大基本原(yuan)理：

1、雙抗體夾心

（1）原(yuan)(yuan)理(li)：雙抗(kang)(kang)體(ti)夾(jia)(jia)心法(fa)是檢(jian)測抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)最常(chang)用(yong)(yong)的方(fang)法(fa)，雙抗(kang)(kang)體(ti)夾(jia)(jia)心法(fa)適用(yong)(yong)于測定擁有至少兩個表位的大(da)分(fen)子抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)。不適用(yong)(yong)于測定半(ban)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)及(ji)小分(fen)子單價(jia)抗(kang)(kang)原(yuan)(yuan)，不能(neng)形成兩位點夾(jia)(jia)心。

（2）應用場景：絕大多數檢測(ce)蛋白(bai)都(dou)可(ke)以使用雙抗體(ti)夾心法。有些(xie)抗體(ti)檢測(ce)項目，如總IgE檢測(ce)。

（3）注意事宜：在(zai)一步法(fa)，待測抗(kang)原與(yu)標(biao)記(ji)抗(kang)體(ti)(ti)一起加入(ru)反(fan)應中，當標(biao)本(ben)中受檢(jian)抗(kang)原的含量很高時，過量抗(kang)原會(hui)分(fen)別(bie)和固(gu)相(xiang)包被(bei)抗(kang)體(ti)(ti)及標(biao)記(ji)抗(kang)體(ti)(ti)結合(he)，不會(hui)形成(cheng)“夾(jia)心復合(he)物”就出現鉤狀效應，導致結果偏低或者(zhe)甚至可(ke)出現假陰(yin)性結果。

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2、雙抗原夾心

（1）原理：雙抗(kang)(kang)(kang)(kang)原夾心法(fa)的(de)反應(ying)模(mo)式與雙抗(kang)(kang)(kang)(kang)體夾心法(fa)類似。用(yong)特異性抗(kang)(kang)(kang)(kang)原進(jin)行包(bao)被和(he)標記。有研(yan)究表明，雙抗(kang)(kang)(kang)(kang)原夾心法(fa)檢(jian)測(ce)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體的(de)靈敏度和(he)準確性要抗(kang)(kang)(kang)(kang)體檢(jian)測(ce)使用(yong)的(de)間接法(fa)（檢(jian)測(ce)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體更為常用(yong)的(de)一種方法(fa)）。

（2）應用場(chang)景：理論上，檢測抗體(ti)的(de)項目均可使用，如乙肝表(biao)面(mian)蛋白抗體(ti)檢測。待檢抗體(ti)IgG的(de)兩個Fab需(xu)要分別同(tong)固相(xiang)包被抗原和標記抗原同(tong)時結合。

（3）注意事(shi)宜(yi)：抗原標記(ji)過(guo)程可能(neng)導致蛋白構象變化(hua)，需要尋找最適(shi)合的標記(ji)物和標記(ji)方法。

3、間接法

（1）原理：間接法(fa)是檢測(ce)抗(kang)(kang)體常用(yong)的(de)方法(fa)。其原理為利用(yong)標記(ji)的(de)抗(kang)(kang)抗(kang)(kang)體，俗稱二抗(kang)(kang)，來檢測(ce)與固相包被抗(kang)(kang)原結合的(de)受檢抗(kang)(kang)體。本法(fa)主要用(yong)于對(dui)病(bing)原體抗(kang)(kang)體的(de)檢測(ce)而進行傳染(ran)病(bing)的(de)診斷。

（2）應用(yong)場景：所有的IgG抗體檢(jian)(jian)測都可以使用(yong)。如新冠(guan)血清IgG檢(jian)(jian)測。

（3）注意事宜：本方法的(de)優點是只(zhi)要變換包被抗原的(de)種類(lei)就可利用同一(yi)標記(ji)抗抗體(ti)（二抗）建(jian)立檢測(ce)相應(ying)抗體(ti)的(de)方法。

4、競爭法

（1）原(yuan)理：當(dang)小分(fen)子抗原(yuan)或半(ban)抗原(yuan)因(yin)缺乏可作(zuo)夾心法的(de)(de)兩個表位供(gong)包(bao)被(bei)(bei)和檢測(ce)抗體同(tong)時識別(bie)結合(he)，因(yin)此不能用(yong)雙抗體夾心法進(jin)行測(ce)定，可以采用(yong)競(jing)爭法模(mo)式(shi)。由于物(wu)質的(de)(de)相(xiang)互作(zuo)用(yong)或者結合(he)是相(xiang)對(dui)動態平衡的(de)(de)過程(cheng)(cheng)，一旦樣本中存在(zai)待(dai)(dai)檢測(ce)物(wu)，樣品中的(de)(de)待(dai)(dai)檢測(ce)物(wu)會(hui)(hui)同(tong)試劑(ji)中的(de)(de)標記物(wu)去(qu)競(jing)爭結合(he)包(bao)被(bei)(bei)物(wu)。這樣就(jiu)會(hui)(hui)導致原(yuan)來(lai)結合(he)在(zai)一起的(de)(de)包(bao)被(bei)(bei)物(wu)和標記物(wu)分(fen)離，使原(yuan)本飽(bao)滿的(de)(de)信(xin)(xin)號(hao)值進(jin)行降低。信(xin)(xin)號(hao)降低的(de)(de)程(cheng)(cheng)度(du)同(tong)待(dai)(dai)檢測(ce)物(wu)的(de)(de)濃度(du)成正相(xiang)關。

（2）應用場(chang)景：小(xiao)分子抗原或(huo)半抗原，如激(ji)素檢(jian)(jian)測，雌二醇，睪(gao)酮；甲狀腺功能檢(jian)(jian)測，T4，T3等。

（3）注意(yi)事宜(yi)：競爭(zheng)法(fa)中，有些(xie)待檢測物分子特別小，很難制(zhi)備或找到適合使(shi)用(yong)的抗(kang)(kang)體，而且生理條(tiao)件下可(ke)(ke)以同其他蛋白結(jie)合，那么可(ke)(ke)以使(shi)用(yong)該分子的結(jie)合蛋白來(lai)代(dai)替抗(kang)(kang)體實現。如(ru)，25OH-Vd檢測，可(ke)(ke)使(shi)用(yong)25OH-Vd特異性抗(kang)(kang)體，也可(ke)(ke)使(shi)用(yong)Vd結(jie)合蛋白。

5、捕獲法（反向間接法）

（1）原理：捕獲包(bao)被(bei)法，又稱為反向間接法，采用抗(kang)(kang)(kang)抗(kang)(kang)(kang)體（二抗(kang)(kang)(kang)）包(bao)被(bei)，抗(kang)(kang)(kang)原進行標記的檢測(ce)(ce)方(fang)法。以目前常用的IgM測(ce)(ce)定(ding)為例，因血清(qing)中針對某種抗(kang)(kang)(kang)原的特異性IgM和IgG同時(shi)存在(zai)，則后者可(ke)干擾IgM的測(ce)(ce)定(ding)。因此先將所有(you)血清(qing)IgM（包(bao)括異性IgM和非特異性IgM）固定(ding)在(zai)固相上，在(zai)去除IgG后再測(ce)(ce)定(ding)特異性IgM。

（2）應用場景(jing)：IgM測定最為常見(jian)，特定過敏原(yuan)IgE檢(jian)測。

（3）注意事宜(yi)：IgM型類(lei)風濕(shi)因子（RF）的干擾，IgE型類(lei)風濕(shi)因子相(xiang)對較(jiao)少。

二、免疫診斷有什么特點

1、特(te)異性強(qiang)，不出現(xian)(xian)交叉反應，不出現(xian)(xian)假陽(yang)性，可保證(zheng)診(zhen)斷的準確性。

2、靈敏度高，能測出(chu)微(wei)量反應物質和輕微(wei)的(de)異(yi)常變化，有利(li)于早期診斷(duan)和排除可疑病例。

3、簡(jian)便、快(kuai)速、安全。