一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚(hou)度通(tong)常為(wei)4～7微(wei)米，切(qie)(qie)出一(yi)片(pian)接一(yi)片(pian)的蠟帶，用毛筆輕托輕放在紙上(shang)。這個厚(hou)度通(tong)常可以(yi)滿足大部分實驗室的需求。如果需要更薄的切(qie)(qie)片(pian)厚(hou)度，則可以(yi)使(shi)用微(wei)切(qie)(qie)機進行(xing)切(qie)(qie)割，厚(hou)度可達1-2微(wei)米，但這種(zhong)切(qie)(qie)片(pian)會更脆弱，操作(zuo)難度更大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切(qie)片的(de)制作步驟如下(xia)：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組(zu)織(zhi)經不同濃度的乙醇(chun)溶液進行逐級脫水(shui)(shui)70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級乙醇(chun) 40min（注意：骨(gu)性及鈣(gai)化組(zu)織(zhi)需在JYBL-Ⅱ脫鈣(gai)液中(zhong)浸泡24h，待組(zu)織(zhi)軟化后再進行乙醇(chun)脫水(shui)(shui)步驟）。

（2）透明：組織依次(ci)浸泡于三個二甲苯中，每缸各1h。

（3）浸蠟：組織依次浸泡于三(san)個石蠟缸中，每缸各1h。

（4）包埋：將(jiang)液(ye)態的石(shi)蠟(la)(la)倒入(ru)模具盒中(zhong)，再(zai)將(jiang)浸好蠟(la)(la)的組織塊平放(fang)底(di)部，注意(yi)切(qie)面方向朝(chao)下(xia)放(fang)置(zhi)，待(dai)石(shi)蠟(la)(la)凝固后去(qu)掉包埋框(kuang)，完(wan)全冷卻變硬(ying)后再(zai)修整蠟(la)(la)塊，組織外圍的石(shi)蠟(la)(la)保留適中(zhong)以便切(qie)片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)切面與刀口成平行方向(xiang)，刀的(de)傾斜(xie)度通常15℃，轉(zhuan)動輪(lun)轉(zhuan)推進器(qi)，調節切片厚(hou)度為4μm，切成厚(hou)度均(jun)勻的(de)切片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片貼(tie)附(fu)后，放(fang)在空氣中稍晾干，放(fang)置65℃烤(kao)(kao)片機上烤(kao)(kao)1h，再放(fang)置烘(hong)箱內(nei)烘(hong)烤(kao)(kao)2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將石(shi)蠟切片(pian)放入二甲苯Ⅰ10min-二甲苯Ⅱ10min-二甲苯Ⅲ10min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-50%酒精5min梯度脫蠟。

4、HE染色

石蠟切片(pian)入蘇木素(su)染0.5-1分鐘min，自(zi)來水(shui)漂(piao)洗(xi)，1%鹽酸酒精(jing)分化數秒(miao)，自(zi)來水(shui)漂(piao)洗(xi)，然(ran)后1%氨水(shui)水(shui)溶(rong)液(ye)(ye)返藍1min，流(liu)水(shui)沖洗(xi)數秒(miao)，放入伊紅(hong)染液(ye)(ye)中(zhong)染色(se)數秒(miao)，流(liu)水(shui)漂(piao)洗(xi)。

5、脫水封片

石蠟切片依次放入(ru)75%乙醇(chun)2min-85%乙醇(chun)2min-無水乙醇(chun)5min-無水乙醇(chun)5min-二甲(jia)苯5min透明(ming)，將(jiang)切片從二甲(jia)苯拿出來(lai)中性樹膠封片。