一、什么是探針
探針是(shi)電(dian)測試的接(jie)觸(chu)媒介,為高端(duan)精(jing)密型電(dian)子五金元器件。
二、探針是干什么用的
探針是一小段單(dan)鏈DNA或者RNA片段(大(da)約(yue)是20到500bp),用于檢測(ce)與其(qi)互補的(de)核酸序列。雙鏈DNA加熱(re)變性成(cheng)為(wei)單(dan)鏈,隨后用放射(she)性同位素(通常(chang)用磷-32)、熒光染(ran)料或者酶(mei)(如(ru)辣根(gen)過氧(yang)化物酶(mei))標(biao)記成(cheng)為(wei)探針。磷-32通常(chang)被摻入組成(cheng)DNA的(de)四種核苷酸之一的(de)磷酸基團中,而熒光染(ran)料和(he)酶(mei)與核酸序列以共價(jia)鍵相連。
當將(jiang)探(tan)針與(yu)(yu)(yu)樣品雜(za)(za)交(jiao)時,探(tan)針和與(yu)(yu)(yu)其互(hu)補的核(he)酸(DNA或(huo)RNA)序列通過氫鍵緊密相連,隨后,未被雜(za)(za)交(jiao)的多余探(tan)針被洗去。最后,根據探(tan)針的標記物(wu)種類(lei),可(ke)進行放射(she)自顯影、熒光(guang)(guang)發(fa)光(guang)(guang)、酶聯化學(xue)發(fa)光(guang)(guang)等方(fang)法(fa)來判斷樣品中是否(fou),或(huo)者何位(wei)置含(han)有被測序列(即與(yu)(yu)(yu)探(tan)針互(hu)補的序列)。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引物設(she)計的用(yong)途(tu):用(yong)于PCR擴(kuo)增技術。
(2)探針設計的(de)(de)用途:用于(yu)標記(ji)待(dai)定的(de)(de)核苷酸片斷,用與(yu)特異性(xing)地、定量地檢(jian)測核酸的(de)(de)量。
2、兩者的實質不同:
(1)引物設計的(de)實質:一小段單鏈DNA或RNA,在核酸(suan)合成反(fan)應時(shi),作(zuo)為每個多核苷酸(suan)鏈進行延伸的(de)出發(fa)點而起(qi)作(zuo)用的(de)多核苷酸(suan)鏈。
(2)探針設(she)計(ji)的實質:在紫外(wai)-可見-近(jin)紅(hong)外(wai)區有(you)特征熒(ying)(ying)光(guang),并(bing)且(qie)其熒(ying)(ying)光(guang)性質(激發和發射波長、強度、壽命、偏振(zhen)等)可隨所處環(huan)境的性質,如極性、折射率、粘度等改變而靈敏(min)地改變的一類熒(ying)(ying)光(guang)性分子。