一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚度通(tong)常(chang)為4～7微米，切出一片(pian)接一片(pian)的(de)蠟(la)帶，用(yong)毛筆輕托輕放在紙上。這個厚度通(tong)常(chang)可(ke)以滿足大(da)部分實(shi)驗室的(de)需求。如果需要更(geng)薄的(de)切片(pian)厚度，則可(ke)以使用(yong)微切機進行切割，厚度可(ke)達1-2微米，但這種切片(pian)會(hui)更(geng)脆弱，操作難度更(geng)大(da)。

二、石蠟切片制作過程是什么

石(shi)蠟切片的制(zhi)作步驟如(ru)下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組(zu)織(zhi)經不同濃度的乙(yi)(yi)醇溶液進行(xing)逐級(ji)脫水(shui)70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級(ji)乙(yi)(yi)醇 40min（注(zhu)意：骨性及鈣化(hua)組(zu)織(zhi)需在JYBL-Ⅱ脫鈣液中(zhong)浸(jin)泡24h，待組(zu)織(zhi)軟化(hua)后再(zai)進行(xing)乙(yi)(yi)醇脫水(shui)步驟）。

（2）透明：組織依次浸(jin)泡于三個二甲苯中，每缸各1h。

（3）浸蠟：組織依次(ci)浸泡于三個石蠟缸中，每缸各(ge)1h。

（4）包埋：將液態的(de)石(shi)(shi)(shi)蠟(la)(la)倒入模具(ju)盒中，再將浸好蠟(la)(la)的(de)組織(zhi)塊(kuai)平放(fang)底部(bu)，注意切面(mian)方向(xiang)朝(chao)下放(fang)置(zhi)，待(dai)石(shi)(shi)(shi)蠟(la)(la)凝固后去掉包埋框，完(wan)全(quan)冷卻變硬(ying)后再修整(zheng)蠟(la)(la)塊(kuai)，組織(zhi)外(wai)圍(wei)的(de)石(shi)(shi)(shi)蠟(la)(la)保留(liu)適中以(yi)便切片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)切(qie)面與刀口(kou)成平行方向，刀的(de)傾斜度通常15℃，轉(zhuan)動(dong)輪轉(zhuan)推進器，調節切(qie)片厚(hou)度為4μm，切(qie)成厚(hou)度均勻的(de)切(qie)片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切片貼附后，放在(zai)空氣中(zhong)稍晾干，放置65℃烤片機上烤1h，再放置烘箱內烘烤2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將(jiang)石(shi)蠟切(qie)片放入二甲(jia)苯Ⅰ10min-二甲(jia)苯Ⅱ10min-二甲(jia)苯Ⅲ10min-無(wu)水(shui)乙(yi)醇Ⅰ5min-無(wu)水(shui)乙(yi)醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-80%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-70%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min-50%酒(jiu)(jiu)精(jing)5min梯度脫(tuo)蠟。

4、HE染色

石蠟切片入(ru)蘇木(mu)素染(ran)0.5-1分(fen)鐘min，自來水漂洗(xi)，1%鹽酸酒(jiu)精(jing)分(fen)化數(shu)(shu)秒，自來水漂洗(xi)，然后1%氨水水溶液返藍(lan)1min，流水沖(chong)洗(xi)數(shu)(shu)秒，放入(ru)伊紅染(ran)液中染(ran)色數(shu)(shu)秒，流水漂洗(xi)。

5、脫水封片

石蠟切片依次放入(ru)75%乙醇(chun)2min-85%乙醇(chun)2min-無水乙醇(chun)5min-無水乙醇(chun)5min-二(er)甲苯5min透明，將切片從二(er)甲苯拿出來(lai)中性樹膠封(feng)片。