1996年，馬(ma)伊琍與(yu)保劍峰、陳龍(long)、高曙(shu)光、張雅琳共同出(chu)演(yan)了電視(shi)劇(ju)《真(zhen)空愛(ai)情(qing)記錄(lu)》，講述(shu)了一群大學(xue)畢業生為了工作和(he)愛(ai)情(qing)奮(fen)斗的(de)故(gu)事。
1998年，馬伊琍畢(bi)業于上海戲劇學院，畢(bi)業后參演(yan)(yan)了第(di)一部改編(bian)自陜西駐(zhu)滬作家李春(chun)平同名(ming)小說的(de)電影(ying)《玻璃是透明的(de)》，飾演(yan)(yan)“小丫子”。同年，其出演(yan)(yan)了第(di)一部古裝電影(ying)《孔(kong)乙己》。
2000年，通過出演《黑(hei)洞》提升了表演事業(ye)。同年，在電視(shi)劇《前世今(jin)生》中(zhong)飾演美貌且氣質超凡的秦婉瑩。
2001年(nian)，出演電(dian)視劇《白(bai)天睡覺的(de)(de)女人》中(zhong)的(de)(de)李秀。同年(nian)，在(zai)電(dian)影《西施(shi)眼(yan)》中(zhong)飾(shi)演施(shi)雨，該(gai)片在(zai)2002年(nian)美國夏威夷國際電(dian)影節中(zhong)獲評(ping)審(shen)團大將(jiang)及亞洲最(zui)佳電(dian)影。
2002年(nian)，因(yin)出演電視劇《還珠格(ge)格(ge)Ⅲ之天(tian)上人間》中的紫薇一角而被大眾所熟知。
2004年，出演(yan)了(le)由黃磊指導的(de)《天(tian)一生水》，在劇中飾(shi)演(yan)一個混血姑娘明妮。
2005年，在張黎導演(yan)的電視劇《錦衣衛》中出演(yan)了(le)傾國美(mei)人(ren)客印(yin)月。
2006年(nian)，參演(yan)的《喬家大院》在(zai)央視(shi)熱播，其扮演(yan)的“江(jiang)雪(xue)瑛”收獲了更多(duo)的觀眾(zhong)和粉絲。
2007年(nian)，因出演由(you)趙寶剛指導的青春勵志電(dian)視劇《奮(fen)斗》而(er)名聲(sheng)驟起，同年(nian)6月底，馬伊琍(li)簽約了內(nei)地影視巨擎橙天娛樂。
2008年(nian)，因拍攝電(dian)視劇《為誰心動》無(wu)悔剃光了頭。同年(nian)，其憑(ping)借影(ying)片《江北好人》，戰(zhan)勝了李(li)冰(bing)(bing)冰(bing)(bing)、范冰(bing)(bing)冰(bing)(bing)兩位(wei)候選人，成為了長春電(dian)影(ying)節影(ying)后(hou)。
2009年，馬伊琍與佟(tong)大為共同出演(yan)了(le)電視劇(ju)《婚姻保(bao)衛戰(zhan)》。同年，出演(yan)的(de)首(shou)部反(fan)映豫(yu)商故事的(de)電視劇(ju)《經緯天地》在CCTV-8播出，這也是她繼《喬家大院》之(zhi)后首(shou)次(ci)登陸央視，劇(ju)中扮演(yan)尚達志的(de)妻(qi)子順兒。
2010年，與涂(tu)松巖合(he)作主演都市題材電視劇《雙城生活》，她在劇中塑造的(de)(de)北(bei)京大妞郝(hao)京妮，受到了網友的(de)(de)普遍好評。憑借該劇，馬伊琍獲得國劇盛典2011年度最佳(jia)女演員(yuan)。
2013年(nian)(nian)年(nian)(nian)初，馬伊琍與杜(du)淳、劉莉(li)莉(li)、陳思斯等合作出演電視劇《青(qing)春期(qi)撞上更年(nian)(nian)期(qi)2》，此外，還客(ke)串了電影(ying)(ying)《不二神探》，并(bing)且徹底顛覆以往的形象痛罵文章(zhang)，成為了影(ying)(ying)片(pian)一大看點。
2013年，首當制(zhi)片人的(de)馬伊琍與首次(ci)當導(dao)演的(de)丈夫文章合作了電(dian)視劇(ju)《小爸爸》。
2015年，出演了公路犯罪片《未擇之路》。11月7日，在電視劇(ju)《北上廣不相信眼淚》中(zhong)飾演潘蕓，憑該劇(ju)獲得第(di)19屆華(hua)鼎獎(jiang)中(zhong)國(guo)百強電視劇(ju)最(zui)佳女主角。
2016年(nian)9月，與(yu)陳建斌(bin)合作(zuo)主演都市幽默(mo)劇《中(zhong)國式關系》，飾演美女建筑(zhu)設計(ji)師江一楠(nan)。
2017年，主演(yan)文章執導的諜戰劇《剃刀邊(bian)緣》，劇中飾演(yan)關(guan)海(hai)丹。同年參演(yan)《建(jian)軍大業》，飾演(yan)向警予角(jiao)色。
一笑易歡
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